[发明专利]一种检测LP的胶乳增强免疫比浊试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及体外诊断试剂领域，特别是涉及一种检测LP的胶乳增强免疫比浊试剂盒。

背景技术

瘦素(Leptin)是一种分子量为16kDa,146个氨基酸组成的单链蛋白，它由肥胖基因编码、脂肪细胞合成分泌的蛋白质类激素。人们普遍认为它进入血液循环后会参与糖、脂肪及能量代谢的调节，促使机体减少摄食，增加能量释放，抑制脂肪细胞的合成，进而使体重减轻。还与炎性反应、神经内分泌、消化道肿瘤、妇产科疾病、肝脏疾病等有关，其代谢的异常参与了相关疾病的发病过程。瘦素的主要功能是调节能量平衡，是维持正常体重的基本激素，实验证明肥胖者血清瘦素浓度均高于非肥胖者。在恶性肿瘤方面，瘦素及其受体的表达与肿瘤，如乳腺癌、胃癌、肝癌等发生和预后密切相关。在慢性肝病中，瘦素水平与病情程度显著相关，不论肝功能异常程度如何，其血清瘦素水平均高于正常人。在正常妊娠中血中瘦素水平随妊娠进展逐渐增加，妊高症时瘦素增加，故瘦素可作为一项临床指标。研究表明早产儿体重下降与血浆瘦素浓度下降之间存在显著正相关。正常情况下胰岛素刺激瘦素分泌，与此同时瘦素通过与胰岛细胞上的受体结合来抑制胰岛素的分泌，提示瘦素与胰岛素及胰岛素抵抗关系密切。研究还发现，原发性高血压患者血清瘦素和胰岛素水平显著升高，相互间成正相关。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明所要解决的技术问题是：提供一种制备成本低廉，稳定性好，易于保存，数据重复性好，检测灵敏度高,可广泛应用于临床生化仪的LP检测试剂盒。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种检测LP的胶乳增强免疫比浊试剂盒，其特征在于，包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1由缓冲液1、稳定剂1、防腐剂1、EDTA、增凝剂和保护剂1组成；所述试剂R2由交联LP抗体的聚苯乙烯胶乳微球、缓冲液2、稳定剂2、防腐剂2、保护剂2组成，其中聚苯乙烯胶乳微球与LP抗体之间以共价交联方式连接。

本技术方案中的防腐剂1和2是指可以抑制试剂中细菌和微生物污染的一类试剂，对试剂具有防腐杀菌的作用。试剂R2中的保护剂一类能够保护胶乳颗粒表面的抗体的试剂。稳定剂1和2可以保持试剂内的电荷平衡。本技术方案中的LP胶乳增强免疫比浊试剂盒，将LP抗体交联在聚苯乙烯胶乳微球表面，当血液中的LP与LP抗体反应时，带动聚苯乙烯胶乳微球聚集产生一定浊度，而浊度与血液中的LP含量在一定范围成正比，可以用全自动生化仪在400-800nm波长下检测血液中LP的含量。

优选的，所述试剂R1中的缓冲液1选自Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液、PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼砂缓冲液中的一种或多种的组合，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L；所述试剂R2中的缓冲液2选自PBS缓冲液、硼砂缓冲液、甘氨酸缓冲液、Hepes缓冲液、GOODS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种，其pH为7.0～9.0，浓度为25～500mmol/L。

本发明试剂R1中的缓冲液1可使用上述本领域各种常用的缓冲液，但为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，本发明中所述试剂R1中缓冲液1优选为包括下列组分：水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠和甘氨酸的水溶液，且水苏糖、明矾、果糖二磷酸钠、六偏磷酸钠、甘氨酸的总浓度为3.5－7.5g/L，缓冲液的pH值为7.2－7.6。

优选的，各组分在缓冲液1中的浓度为：

所述缓冲液1的溶剂为水。

所述缓冲液1可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。

优选的，所述试剂R1中的稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或多种的组合，其质量浓度为0.5％～10％；所述试剂R2中的稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na₂CO3、Na₂SO4或K₂SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或葡萄糖。

上述技术方案中稳定剂1选自KCl、NaCl、CaCl中的一种或多种的组合，其质量浓度为0.5％～10％，这样的稳定剂1具有价格低廉、原料易得的优点。稳定剂2采用离子稳定剂和悬浮稳定剂配合使用；其中离子稳定剂为NaCl、KCl、Na₂CO3、Na₂SO4或者K₂SO4，悬浮稳定剂为PEG8000、蔗糖、甘油或者葡萄糖；其中优选NaCl和蔗糖配合使用，这样可以保持体系长期稳定。