[发明专利]一种水体游离基因污染物的浓集回收方法

权利要求书

1.一种水体游离基因污染物的浓集回收方法，其特征是包括如下步骤：

(1)核酸吸附颗粒的制备：按比例，将12.6g的氯化铝缓慢加入至2L去离子水中，充分溶解后，加入2mol/L的碳酸钠水溶液90ml，混匀，调节pH＝7.2，形成凝胶；静置6～12h，除去上清，用0.14mol/L的NaCl水溶液洗涤凝胶2次后，再加入0.14mol/L的NaCl水溶液至2L，得到含水氢氧化铝凝胶，灭菌；将粒度在60～100目的层析用硅胶，经过蒸馏水淘洗除去漂在水面上的颗粒后，灭菌，按每300g灭菌后层析用硅胶加入0.5-1L含水氢氧化铝凝胶的比例，使灭菌后层析用硅胶浸透混匀，烤干，得到核酸吸附颗粒；

(2)洗脱液的配制：将15g氯化钠、30g胰蛋白胨、15g牛肉粉和3.75g甘氨酸加水至1L，用0.1M氢氧化钠水溶液调节pH至9；

(3)将所述核酸吸附颗粒装入长与直径比为5-35的过滤柱中并至过滤柱高度的2/3处；将待测水样以300-50毫升/分钟的速度匀速流过过滤柱后，再用洗脱液以40-50毫升/分钟的速度匀速流过过滤柱，用灭菌容器收集流出的洗脱液，即为游离基因污染物的一次浓集液；在无菌条件下，利用注射器将一次浓集液通过孔径为0.45微米的无菌滤器以除去细菌；除菌后的滤过液加入等体积无水乙醇或异丙醇并静置0.5-2小时后，离心收集沉淀；用2.5-50毫升的无菌双蒸水溶解沉淀，即为游离基因污染物的最终浓集液；所述待测水样与洗脱液的体积比为100：1-5。

2.根据权利要求1所述的一种水体游离基因污染物的浓集回收方法，其特征是待测水样的水源为自来水、纯净水、井水、回用水、二级出水、地表水或生活污水。