[发明专利]基于核酸内切酶特异性识别的细胞分选系统的应用有效
申请号: | 201410737627.5 | 申请日: | 2014-12-05 |
公开(公告)号: | CN104450617A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
发明(设计)人: | 蓝田;J·盖茨;郑敦武 | 申请(专利权)人: | 赛业(苏州)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0784 | 分类号: | C12N5/0784;C12N5/0783 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 马伟 |
地址: | 215400 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 核酸 内切酶 特异性 识别 细胞 分选 系统 应用 | ||
1.基于核酸内切酶特异性识别的细胞分选系统在分选细胞中的应用,其特征在于,所述的分选系统包含以下组分:第一单链核苷酸、第二单链核苷酸、抗体、细胞分选介质、限制性内切酶;所述的第一单链核苷酸和第二单链核苷酸互补,且互补区域含有所述限制性内切酶的识别位点;所述的第一单链核苷酸、第二单链核苷酸、抗体、细胞分选介质均被修饰,修饰后的第一单链核苷酸可与修饰后的抗体相连接,修饰后的第二单链核苷酸可与修饰后的细胞分选介质相连接。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的第一单链核苷酸和第二单链核苷酸为部分序列互补或完全互补。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的第一单链核苷酸或第二单链核苷酸的长度为6bp-1kb。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的第一单链核苷酸或第二单链核苷酸的长度为18bp-50bp。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的细胞分选介质为磁珠、分离柱或聚阳离子纳米颗粒。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的第一单链核苷酸被巯基修饰,所述的第二单链核苷酸被生物素修饰,所述的抗体被顺丁烯二酰亚胺修饰,所述的磁珠被链霉亲和素修饰。
7.分选DC细胞、NK细胞和CIK细胞的试剂盒在分选DC细胞、NK细胞和CIK细胞中的应用,其特征在于,所述的试剂盒包含以下组分:巯基与生物素修饰的三对单链核苷酸,CD3、CD56和HLA-DR抗体,链霉亲和素磁珠,限制性内切酶BamH I、EcoR I、Hind III。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的三对单链核苷酸的互补区域分别包含限制性内切酶BamH I、EcoR I、Hind III的识别位点。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的三对单链核苷酸的序列分别如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.6所示。
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