[发明专利]一种快速获得洋桔梗品种间杂交种的方法

权利要求书

1.一种快速获得洋桔梗品种间杂交种的方法，其特征在于，包 括以下步骤：

(1)将父、母本在开花前一天进行套袋隔离，第二天上午，取 新鲜的父本花粉对母本进行授粉，授粉后进行套袋隔离；

(2)摘取授粉后瘦果授粉，在超净工作台上取出子房，后将子 房用流水冲洗5～10min，再用70～75％的乙醇消毒30～50s后，置于0.1％ 的升汞溶液中4～5min，然后用无菌水冲洗5-6次，冲洗后用无菌的刀 片划开种皮，取其胚作为外植体；

(3)将外植体置于接种培养基中进行培养，每瓶接种胚胎10-15 个；35d后转入继代培养基中进行继代培养，得到幼苗后转到分化培 养基中扩繁，扩繁得到幼苗后，将幼苗转移到生根培养基中进行生根 培养，筛选获得单体植株；

(4)炼苗移栽：先将培养瓶移至温室，自然条件下炼苗4d，待 洋桔梗苗健壮且有5-7片真叶、6-8cm高时，然后解开封口膜，炼苗6d， 移栽到经消毒的基质中，温度控制在24-26℃，前7d湿度控制在70％ 左右，以后逐渐降低湿度，直至将移栽苗置于自然条件下；

(5)大田管理：将移栽成活的洋桔梗苗正常管理，得到杂交一 代洋桔梗新品种。

2.根据权利要求1所述一种快速获得洋桔梗品种间杂交种的方 法，其特征在于，所述步骤二中，取子房的时间为授粉后8～12d。

3.根据权利要求1或2所述的快速获得洋桔梗品种间杂交种的方 法，其特征在于，所述步骤三中接种培养基为：MS+2，4-D 2mg/L+ 6-BA 1.5mg/L；所述继代培养的培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L；所述的分化培养基组成为MS+6-BA 0.2mg/L；所述生根培 养基组成为1/2MS+NAA0.1～0.2mg/L+IBA0.1～0.2mg/L+蔗糖或 白砂糖20～30g/L+琼脂7～8g/L。

4.根据权利要求1或2所述的快速获得洋桔梗品种间杂交种的 方法，其特征在于，所述接种培养的培养条件为温度24-26℃，pH为 6.3，光周期为14h光照/10h黑暗，光强为1200Lx；继代培养和分化 培养的培养条件为温度为23±1℃，pH为6.3，12h/d的光周期，光 照强度1600Lx；生根培养的培养条件为培养温度为23±1℃，pH为 6，14-18h/d的光周期，光照强度1400Lx。