[发明专利]一种快速检测植物乳杆菌ST-III的引物及其检测方法和试剂盒

权利要求书

1.一种植物乳杆菌ST-III菌株的特异性标记分子，其特征在于：

所述特异性标记分子是编码植物乳杆菌ST-III的KdpA蛋白质的基因，位于植物乳杆菌ST-III来源的pST-III质粒上。

2.如权利要求1所述的植物乳杆菌ST-III菌株的特异性标记分子，其特征在于：

所述的特异性标记分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第720位至第1200位所示。

3.一种检测植物乳杆菌ST-III菌株的引物对，其特征在于：

该引物对中，一条引物和植物乳杆菌ST-III菌株的特异性标记分子的序列中的一段相同，长度为15-40bp；另一条引物和植物乳杆菌ST-III菌株的特异性分子标记的序列中的一段互补，长度为15-40bp，该引物对扩增出的片段长度为200-1773bp。

4.如权利要求3所述的检测植物乳杆菌ST-III菌株的引物对，其特征在于：

所述引物对中，一条引物的序列如SEQ ID NO.2所示，另一条引物的序列如SEQ ID NO.3所示。

5.一种检测植物乳杆菌ST-III菌株的试剂盒，其特征在于：

该试剂盒包括如权利要求3或4所述的引物对。

6.如权利要求5所述的检测植物乳杆菌ST-III菌株的试剂盒，其特征在于，还包括：

dNTP；10×PCR缓冲液和Taq DNA聚合酶。

7.一种植物乳杆菌ST-III菌株的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，提取待测样品菌株中的质粒DNA；

步骤二，以步骤一所得的所述质粒DNA为模板，以权利要求3或4所述的引物对进行PCR反应；

步骤三，对步骤二所得的PCR反应产物进行电泳检测，检测是否存在权利要求3或4所述的引物扩增出的片段。

8.如权利要求7所述的植物乳杆菌ST-III菌株的检测方法，其特征在于：

其中，步骤二中所述的PCR反应的反应体系包括

所述引物对，该引物对中的两种引物的浓度均为0.5mmol/L；0.2mmol/L的dNTP；1×PCR buffer；1.5mmol/L的Mg²⁺；0.02U/μL的Taq DNA聚合酶；以及1.0-2.0ng/μL的DNA模板。

9.如权利要求7所述的植物乳杆菌ST-III菌株的检测方法，其特征在于：

其中，步骤二中所述的PCR反应的反应程序依次为，95℃，3min；95℃下45s,55℃下45s,72℃下1min，进行30个循环；72℃，5min；4℃保存。

10.如权利要求1所述的特异性标记分子作为植物乳杆菌ST-III菌株的特征序列在检测植物乳杆菌ST-III菌株中的应用。