[发明专利]一种防控连作草莓根腐病的拮抗放线菌及其生防制剂的制备方法在审
申请号: | 201410749393.6 | 申请日: | 2014-12-09 |
公开(公告)号: | CN104403976A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
发明(设计)人: | 王世梅;沈婷;王辰;徐阳春;沈标;韦中;沈其荣 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/55 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;李晓峰 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 连作 草莓 根腐病 拮抗 放线菌 及其 制剂 制备 方法 | ||
1.一种防控连作草莓根腐病的拮抗放线菌,该菌株B04属于吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus),其菌种保藏号为CGMCC NO.9918。
2.权利要求1所述的菌株B04在制备放线菌生防制剂中的应用。
3.一种放线菌生防制剂,其特征在于是将权利要求1所述的菌株B04扩大培养后接种到以蚯蚓粪和麦麸为主要原料的发酵培养基中进行发酵培养得到孢子总数≥1010个/g的放线菌生防制剂。
4.利用权利要求1所述菌株B04制备放线菌生防制剂的方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)放线菌液体种子扩大培养:取菌株B04的分生孢子,接种到液体种子培养基中,摇床培养得到放线菌液体种子;
(2)制备放线菌生防制剂:将蚯蚓粪和麦麸混合均匀后调节含水率至50%~60%、pH至8.5~9.0,每Kg基质中添加5g CaCO3,混匀后,装入固体发酵罐中灭菌后,按10%~15%(w/w)的比例接入步骤(1)制备的放线菌液体种子,发酵培养制得放线菌生防制剂。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于步骤(2)中所述蚯蚓粪和麦麸的质量比为1:1~1.5。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于步骤(2)中所述蚯蚓粪中有机质的质量百分含量为25%~38%。
7.根据权利要求4所述的方法,其特征在于步骤(2)中所述发酵的条件为:控制罐温28~30℃、通气量1~3m3/h和罐压0.01~0.05Mpa,每隔8h搅拌一次,转速50~70rpm,搅拌20~30min。
8.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述的放线菌生防制剂中菌株B04孢子总数≥1010个/g。
9.根据权利要求4所述的方法,其特征在于步骤(1)中所述液体种子培养基的配方为:黄豆粉30.0g/L,葡萄糖45.0g/L,酵母膏5.0g/L,CaCO33.0g/L,pH 7.5~8.0;所述摇床培养的条件为在温度28~30℃下,转速180r/min的条件下摇床培养48h。
10.权利要求2、3或4中所述的放线菌生防制剂在防控连作草莓根腐病中的应用。
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