[发明专利]诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法在审
| 申请号： | 201410750830.6 | 申请日： | 2014-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN104593325A | 公开（公告）日： | 2015-05-06 |
| 发明（设计）人： | 陶然;韩研妍;李进;周向军 | 申请（专利权）人： | 深圳源正细胞医疗技术有限公司;深圳市源兴生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0784 | 分类号： | C12N5/0784;A61K39/00;A61K35/15;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 李志东 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 dc 成熟 分泌 浓度 因子 方法 | ||
1.一种诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，步骤为：将前体单核细胞用新鲜的无血清树突状细胞培养液悬浮，使细胞密度为2x105-1x106/ml，在37℃，5％CO2培养箱中培养5-6天，然后加入IL-1β与TLR刺激，并于37℃，5％CO2培养箱培养24-48小时后收获成熟的树突状细胞。
2.权利要求1所述诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，所述IL-1β的用量是500-10000U/ml，TLR的用量是1-50ng/ml。
3.权利要求2所述诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，所述IL-1β的用量为1000U/ml，TLR的用量为5ng/ml。
4.权利要求1所述诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，所述前体单核细胞是外周血单个核细胞。
5.权利要求1所述诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，所述的无血清树突状细胞培养液是含有500U/ml的GM-CSF和400U/ml的IL-4的无血清培养液。
6.权利要求5所述诱导DC成熟并分泌高浓度促炎因子的方法，其特征在于，所述的无血清培养液是Life Technology公司的AIM-V，或者Lonza公司的X-VIVO。
7.权利要求1-6任一项所述方法制备得到的成熟DC细胞用于制备临床细胞治疗和肿瘤免疫治疗药物或疫苗的用途。
8.一种组合物，其特征在于，由IL-1β与TLR组成，在树突状细胞培养液中，IL-1β的用量是500-10000U/ml，TLR的用量是1-50ng/ml。
9.权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述IL-1β的用量是1000U/ml；TLR的用量是5ng/ml。
10.权利要求8或9所述的组合物在促进树突状细胞成熟中的用途。
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