[发明专利]小新月菱形藻高效养殖和采收方法在审
申请号: | 201410752220.X | 申请日: | 2014-12-11 |
公开(公告)号: | CN104480017A | 公开(公告)日: | 2015-04-01 |
发明(设计)人: | 王培磊 | 申请(专利权)人: | 临沂大学 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 276000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新月 菱形 高效 养殖 采收 方法 | ||
1.一种小新月菱形藻高效养殖和采收方法,其特征在于具体方法如下:
步骤(1)培养液的准备
培养液成分:牛粪浸出液1份,NH4VO3 0.001份,CaCl2·2H2O 0.1份,Na2MoO4 0.005份,FeC6H5O7 0.002份,Co(NO3)2·6H2O 0.02份,人尿0.8份,NaNO3 0.4份,(NH4)2SO4 0.2份,Na2HPO4·2H2O 0.1份,CuSO4·5H2O 0.05份,EDTA 0.02份,FeCl3 0.001份,MgSO4·7H2O 0.6份,K2SiO3 0.025份,吲哚乙酸0.003份,海泥浸出液1.2份,维生素H 0.0002份,肌醇0.001份,叶酸0.01份,胸间氮苯0.004份,煮沸冷却海水1000份;装入棕色磨口塞试剂瓶中,密封,放在摇床上摇匀15分钟,置入4℃冰箱保存,备用;
步骤(2)接种培养
取两个65升带盖的大口白塑料桶,分别加入步骤1所述培养液40升,选生长旺盛、无污染、处于指数生长期的小新月菱形藻藻种分别接种,接种要在上午9-10点进行,接种密度4万个细胞/每毫升藻液,轻轻摇匀3分钟,每个盖子上打上2个孔,孔直径10毫米,每个盖子上插入2根管子,一根为塑料管,用以充气,长3米,直径8毫米,另一根较短,长30厘米,直径8毫米,为比较硬的料管,用以排气;第一个桶的充气管一端连接空气压缩机,另一端插入到藻液底部,用以充气,充入混合气体,气体成分=空气97%+纯CO2 2.5%+纯氨气0.5%,连续不间断充气,气量不宜太大,以让藻细胞浮起不下沉即可;第二个桶的充气管与第一个桶的排气管以料管相连,如此一来,充入的气体可以得到二次利用,提高了气体利用率,将这两个塑料桶放入微藻培养室中培养,室内空调控温,日光灯管照明,以打开灯管的数量多少来控制光照强度,连续培养11天,前6天调节温度至17℃,光照强度12000lux(因塑料桶壁的阻挡和吸收作用,到达藻液的实际光照强度约为6000lux),光暗周期=14h/L+10h/D,即提供间歇光,14小时连续光照,10小时黑暗;后5天,调节温度至20℃,光照强度18000lux,每天提供24小时连续光照,至第11天,藻细胞密度可达到160万/每毫升藻液,后转入下一步骤;
步骤(3)藻细胞采收
取甲壳素,明矾,聚丙烯酰胺适量,分别用粉碎机粉碎至面粉状(粒径大小以通过120目筛绢为宜),按甲壳素1份,明矾2份,聚丙烯酰胺1份的比例混合,用搅拌机充分搅拌、混合30分钟,直至均匀,制成复合沉淀剂,取步骤2所述培养后的藻液1000份,加入复合沉淀剂0.8份,玻璃棒充分搅拌、混合均匀,静置、沉淀24小时,弃上清液,取底部绿色藻泥,藻细胞采收完毕。
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