[发明专利]小新月菱形藻高效养殖和采收方法

说明书

技术领域  本发明属于水产养殖领域，尤其涉及一种小新月菱形藻高效养殖和采收方法。

背景技术

小新月菱形藻Nitzschia closterium俗称“小硅藻”，隶属硅藻门，羽纹硅藻纲，管壳缝目，菱形藻科，菱形藻属，为暖温性、咸水种或半咸水种藻类植物。藻体为单细胞，主要生长在沿海潮间带滩面上，也浮游于近海水体，我国各海区均有。细胞中央膨大，呈纺锤形，两端渐尖，笔直或朝同一个方向弯曲似月牙形。细胞长12-23微米，宽2-3微米。中央有一个胞核，色素体黄褐色，两片，位于胞核两侧，行纵分裂繁殖。生长繁殖适温5-28℃，最适15-20℃，超过28℃，藻细胞停止生长，最终大量死亡。盐度适应范围广，18-61.5‰，最适25-32‰。最适光照强度4000-20000lux，小型培养时忌直射阳光。适应pH范围7-10，最适7.5-8.5。该藻大小适口，营养丰富，是中国较早培养和应用的单细胞饵料，广泛用作栉孔扇贝、贻贝、泥蚶、毛蚶、魁蚶、杂色蛤、牡蛎、缢蛏、中国对虾、基围虾、南美白对虾、毛虾等的开口饵料，有重要培养价值。

关于小新月菱形藻的培养方法，过去张新建曾公开了一种富含油脂新月菱形藻及其优化培养基和规模化培养方法(申请号CN201010238174)，所述藻种为新月菱形藻(Nitzschia closterium)BC6，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No.3747；所述优化培养基为发明人优选自养培养基和异养培养基；所述规模化培养方法包括光合自养培养和异养规模化培养。在优化培养条件下，藻细胞生长迅速，比生长速率大，细胞密度高，油脂含量达到65％。该法投资少，培养简单，效益较高，但操作麻烦，易污染，难以在生产中推广应用。另外，郑维发明了一种培养新月菱形藻的方法及其专用培养基(申请号CN200410047885)。该发明所提供的培养基，配方为：硝酸钠，180-220mg；磷酸二氢钾，18-22mg；硅酸钠，90-110mg；碳酸氢钠，400-500mg；柠檬酸铁，0.45-0.55mg；维生素B₁₂，0.35-0.55μg；维生素B₁，350-450μg；乙二胺四乙酸二钠，1.8-2.2mg；脲素，3.5-4.5mg；海水定容至1000ml。应用该发明所提供的培养基培养新月菱形藻，包括如下步骤：1)用海水配置培养基；2)新月菱形藻藻种密度为3×10⁵细胞/毫升，按与培养基体积比为1∶5-9的比例将新月菱形藻接种到培养基中，在19-25℃，光照强度3000-6000lux，光照时间8-12h/天条件下通气培养。该发明所提供的ZBNC培养基采用开放式的培养方式即可获得新月菱形藻及其目标产物，效果明显，运行稳定可靠，但工艺复杂，操作麻烦，基建投资大，成本高，效益差。

为了克服目前技术的不足，本发明公开了一种小新月菱形藻高效养殖和采收方法，在微藻培养室中采用白塑料桶充气培养，且采用两个塑料桶串联的方式，使充入的气体得到二次利用，节约了能量和资源，培养采用二阶段养殖法，第一阶段即前6天提供较低的温度和光照强度，有利于藻细胞生长且避免强光对细胞造成光伤害，第二阶段即后5天提高了温度和光照强度并延长了光照时间，有利于高不饱和脂肪酸的积累。本发明还对传统培养液配方进行了优化，补充了牛粪浸出液，NH₄VO₃，CaCl₂·2H₂O，Na₂MoO₄，FeC₆H₅O₇，Co(NO₃)₂·6H₂O，人尿，NaNO₃，(NH₄)₂SO₄，Na₂HPO₄·2H₂O，CuSO₄·5H₂O，EDTA，FeCl₃，MgSO₄·7H₂O，K₂SiO₃，吲哚乙酸，海泥浸出液，维生素H，肌醇，叶酸，胸间氮苯等成分，营养更全面、均衡，不易污染，成本低，易于操作，小新月菱形藻产量提高150％。另外，以前小心月菱形藻的采收采用离心法或单一沉淀剂，耗电多，沉淀不彻底，费用高，现在本发明采用复合沉淀剂，沉淀速度快，沉淀彻底，节约资金，适于大规模应用。