[发明专利]一种金花茶的组培方法

权利要求书

1.一种金花茶的组培方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）外植体的消毒：采摘5～7月份的金花茶叶，使用20～40%乐果乳剂稀释400～600倍液浸泡5～10min，取出后，放入超净工作台使用4%维生素C水溶液浸泡30min后，再用0.15%的HgCl₂进行消毒20～30min，然后用无菌水冲洗3～5次，再用0.25%的HgCl₂进行消毒20～30min，最后使用灭菌滤纸吸干金花茶叶表面的无菌水；

（2）愈伤组织培养：使用解剖刀沿着金花茶叶的茎干位置横切出长15～18cm，宽10～15cm的叶条片，将叶条片放入已经装入愈伤组织培养基的培养皿中，轻压叶条片，在29～31℃下暗培养8～15天，而后转入26～28℃下进行8～15天的暗培养，获得金花茶愈伤组织；

（3）愈伤组织分化芽：将上述得到的愈伤组织移置芽诱导培养基中，其中，芽诱导培养基的配方为MS+6～8g/L琼脂+25～29 g/L蔗糖+ 0.3～0.8mg/L 6～苄基嘌呤+0.8～1.5mg/L 萘乙酸，调节培养基的pH值为6.0～6.5，于25～28℃条件下，光暗培养30～45天后愈伤组织分化出芽；

（4）芽生根：待步骤（3）中芽长至5～6cm时，将芽移置根诱导培养基中，其中，根诱导培养基的配方为MS+6～8g/L琼脂+25～29g/L蔗糖+0.8～2.5mg/L吲哚乙酸+0.5～1.5mg/L萘乙酸+0.8～1.5mg/L活性炭+0.8～1.5mg/L的硫酸亚铁，于25～28℃条件下，光暗培养20～30天，培养出幼苗，组培结束。

2.根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述每个培养皿放入3～5片的叶条片。

3.根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述愈伤组织培养基的配方为MS+6～8g/L琼脂+25～29 g/L蔗糖+ 0.3～0.8mg/L 6～苄基嘌呤+0.8～1.5mg/L 萘乙酸，调节培养基的pH值为6.5～7.0；将培养基放入高温灭菌锅，在121～130℃、1.1～1.5 kg/cm²条件下进行灭菌30～50min，然后取出冷却至45℃后迅速在超净工作台中倾倒分装到已经经过高温灭菌锅灭菌的培养皿中。

4.根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述培养皿的规格为90×15mm；所述装入培养皿中的培养基为培养皿体积的1/3～1/2。

5.根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述步骤（3）和步骤（4）中的光暗培养周期为光培养20～22h，暗培养2～4h。

6.根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述步骤（3）中光培养的光照强度为1500～1700勒克斯，步骤（4）中光培养的光照强度为2000～3000勒克斯。

7. 根据权利要求1所述的金花茶的组培方法，其特征在于，所述金花茶叶为颜色嫩绿、完整、无病虫害；金花茶叶的采摘时间为晚上1～2点。