[发明专利]一种金花茶的组培方法

说明书

技术领域

本发明属于组织培养生产技术领域，本发明涉及一种金花茶的组培方法。

背景技术

金花茶属于山茶科、山茶属，与茶、山茶、南山茶、油茶、茶梅等为孪生姐妹。金花茶的花金黄色，耀眼夺目，仿佛涂着一层蜡，晶莹而油润，似有半透明之感。金花茶单生于叶腋，花开时，有杯状的、壶状的或碗状的，娇艳多姿，秀丽雅致。以前，人们没有见到过花色金黄的种类。1960年，中国科学工作者首次在广西南宁一带发现了一种金黄色的山茶花，被命名为金花茶。国外称之为神奇的东方魔茶，被誉为“植物界大熊猫”、“茶族皇后”。

金花茶是一种古老的植物，极为罕见，分布极其狭窄，全世界90%的野生金花茶仅分布于中国广西防城港市十万大山的兰山支脉一带，生长于海拔700米以下，以海拔200～500米之间的范围较常见，垂直分布的下限为海拔20米左右。如金花茶在防城县大王江附近的滨海丘陵台地仍有分布。垂直分布的上限可达海拔890米，如宁明县那陶大山仍可见到个别小瓣金花茶，数量极少，是世界上稀有的珍贵植物。金花茶喜温暖湿润气候，喜欢排水良好的酸性土壤，苗期喜荫蔽，进入花期后，颇喜透射阳光。对土壤要求不严，微酸性至中性均土壤中可生长。耐瘠薄，也喜肥，耐涝力强。

据中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、广西壮族自治区疾病预防控制中心、广西壮族自治区卫生监督检验中心、北京疾病预防控制中心中心营养与食品安全所、广西壮族自治区分析测试研究中心、广西中医学院、广西农学院实验中心等权威机构检验表明：金花茶属无毒级、含有400多种营养物质、无毒副作用。富含茶多糖、茶多酚、总皂甙、总黄酮、茶色素、咖啡因、蛋白质、维生素B1、B2、维生素C、维生素E、叶酸、脂肪酸、B-胡萝卜素等多种天然营养成份；金花茶含有茶氨酸、苏氨酸等几十种氨基酸，以及富含有多种对人体具有重要保健作用的天然有机锗(Ge)、硒(Se)、钼(Mo)、锌(Zn)、钒(V)等微量元素，和钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)等宏量元素。自2009年成功举办首届金花茶节以来，金花茶节成为了防城港市主打的四大文化节庆品牌之一。金花茶产业也得到了迅速发展，涌现出桂人堂金花茶、中港高科国宝金花茶、百喜金花茶等一批龙头企业，金花茶系列产品分获广西名牌产品、广西著名商标，产品畅销国内外市场，年产值超过12亿元。

由此可见金花茶深受大众的喜爱，提高金花茶的产量就要对金花茶进行后代繁殖，为了满足这一需求，本发明提供一种金花茶的组培方法，能够快速的对金花茶进行组织培养繁殖，且出苗率较高。

发明内容

本发明针对上述存在的问题，提供一种金花茶的组培方法，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、利于工业化生产和自动化监控大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。

本发明的方案是通过这样实现的：

一种金花茶的组培方法，包括如下步骤：

（1）外植体的消毒：采摘5～7月份的金花茶叶，使用20～40%乐果乳剂稀释400～600倍液浸泡5～10min，取出后，放入超净工作台使用4%维生素C水溶液浸泡30min后，再用0.15%的HgCl₂进行消毒20～30min，然后用无菌水冲洗3～5次，再用0.25%的HgCl₂进行消毒20～30min，最后使用灭菌滤纸吸干金花茶叶表面的无菌水。

（2）愈伤组织培养：愈伤组织培养：使用解剖刀沿着金花茶叶的茎干位置横切出长15～18cm，宽10～15cm的叶条片，将叶条片放入已经装入愈伤组织培养基的培养皿中，轻压叶条片，在29～31℃下暗培养8～15天，而后转入26～28℃下进行8～15天的暗培养，获得金花茶愈伤组织；采用光暗培养的方式，暗培养的时间原大于光培养，可以避免金花茶叶修复期间过多的光照使其进行光合作用生成糖类，失去金花茶叶体内的一部分物质和能量，使得完成修复过程的物质和能量的总量减少，造成形成愈伤组织的时间变慢。

（3）愈伤组织分化芽：将上述得到的愈伤组织移置芽诱导培养基中，其中，芽诱导培养基的配方为MS+6～8g/L琼脂+25～29 g/L蔗糖+ 0.3～0.8mg/L 6～苄基嘌呤+0.8～1.5mg/L 萘乙酸，调节培养基的pH值为6.0～6.5，于25～28℃条件下，光暗培养30～45天后愈伤组织分化出芽；添加6～苄基嘌呤在培养基中具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老；将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能。