[发明专利]一种人白细胞介素-29的重组变异体及其制备方法

权利要求书

1.本发明中的重组人白细胞介素-29变异体(rhIL-29L)特征在于表达的IL-29肽链中第33位氨基酸赖氨酸(Lys)经人工定点突变为精氨酸(Arg)，对应于序列表中的SEQ ID NO：1。

2.本发明中经人工定点突变改造的人白细胞介素-29变异体的编码基因序列，其特征在于该序列中第98位碱基由A(腺嘌呤)突变为G(鸟嘌呤)，由该碱基组成的三联体密码由AAG突变为AGG，对应于序列表中的SEQ ID NO：2。

3.本发明中表达重组人白细胞介素-29变异体的重组真核表达载体，其特征在于所述的重组真核表达载体中插入了权利要求2所述的人白细胞介素-29变异体的编码基因。

4.本发明中的重组毕赤酵母工程菌，其特征在于所述的重组毕赤酵母的染色体中整合有权利要求2所述的人白细胞介素-29变异体的编码基因，并且分泌表达重组人白细胞介素29变异体至培养液中。

5.一种制备重组人白细胞介素-29变异体的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)用适当的培养液，培养权利要求4所述的重组毕赤酵母工程菌；

(2)在培养液中添加适当的诱导剂，诱导重组毕赤酵母工程菌分泌表达重组人白细胞介素-29变异体；

(3)从培养液中分离纯化出重组毕赤酵母分泌表达的重组人白细胞介素-29变异体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)所用的培养液为BMGY培养液和BMMY培养液；步骤(2)所用的诱导剂为甲醇，添加甲醇的终浓度为培养液体积的1.5％；步骤(3)所用的分离纯化方法为先用强阳离子型离子交换层析分离培养液中的重组人白细胞介素-29变异体，再用凝胶过滤层析得到纯化的重组人白细胞介素-29变异体。