[发明专利]高温木质纤维素酶协同酶解制备可发酵糖的方法有效
| 申请号： | 201410759454.7 | 申请日： | 2014-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN104450829B | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 韩业君;彭小伟;米朔甫 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C12P19/14 | 分类号： | C12P19/14;C12P19/02;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酶解 木质纤维素酶 纤维素原料 生物转化 天然木质 胞外酶 降解 秸秆 木质纤维素原料 协同 生物质预处理 综合生产成本 半纤维素酶 纤维素酶系 预处理过程 半纤维素 底物诱导 可发酵糖 清洁环保 纤维素酶 纤维素 胞内酶 木聚糖 糖损失 抑制物 制备 应用 | ||
1.一种高温木质纤维素酶协同酶解制备可发酵糖的方法，包括以下步骤：
1)以0.1‐2％的木质纤维素原料为碳源，60‐90℃下利用极端嗜热菌发酵20‐72h；
2)发酵结束后离心，分离细胞和上清液，细胞pH5.0‐7.6的缓冲液悬浮，经超声破壁后，离心去除细胞壁，上清液即为胞内木质纤维素酶，发酵上清液用饱和度为70‐80％硫酸铵溶液沉淀蛋白，离心去除上清液后，用pH5.0‐7.6的缓冲液溶解蛋白，吸入透析袋内在pH5.0‐7.6的缓冲液透析过夜，透析完成后用聚乙二醇在透析袋外吸附浓缩蛋白，蛋白浓度达到0.5‐2mg/ml，收集蛋白溶液即为胞外酶；
3)用步骤2)获得的胞内和胞外木质纤维素酶与商业化的纤维素酶协同酶解木质纤维素原料制备可发酵糖，具体酶解方法为：用胞外酶单独或胞内酶与胞外酶按照1:100‐100:1的比例混合在60‐85℃下酶解天然木质纤维素原料24‐72h后，再加入商业纤维素酶制剂在50‐55℃下酶解48‐72h，得到可发酵糖。
2.按权利要求1所述的方法，所述的极端嗜热菌为热解纤维素菌属Caldicellulosiruptor菌种。
3.按权利要求1所述的方法，所述的商业化纤维素酶制剂为所有在市场上能购买到纤维素酶制剂。
4.按权利要求1所述的方法，所述的可发酵糖为葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖中的一种或几种。
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