[发明专利]一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法

权利要求书

1.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：该方法以花生果腐病病原菌Calonectria sp.为接入菌，在花生的苗期、盛花期、浆果期采用掩埋喷灌方法接入；花生种植前土壤需均质化，并按随机种植模式种植；为保证接入等量菌种，首先进行病原菌快速、大批的半定量培养，而后在各接种时期按等量接种方法接入；收获时对各品种烂果率进行统计。

2.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的病原菌为Calonectria sp. 保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2014.10.20，保藏号为CGMCC No. 9807；该菌是从花生果腐病病果中分离纯化获得，其ITS序列与Calonectria morganii相似度为99%。

3.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的土壤均质化是指：田间种植土壤需深耕、翻匀、耙细、整平；而盆栽土壤需堆积后翻匀、等量分装；使供试土壤尽可能保证均质化。

4.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的随机种植模式是指田间种植需划分小区，每个小区1.32 m²，每个品种设置三个重复处理，小区位置随机划分；采用双粒播种，穴距15cm，大小行距80cm、30cm，垄长1.65m；盆栽试验也是每个品种设置三个重复，一个重复5棵，各处理种植、管理模式一致。

5.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的病原菌快速、大批的半定量培养是指首先将冻存菌在改良察氏培养基平板上活化，活化后采用打孔法将两个5mm的菌斑接入50ml改良察氏液体培养基中，28℃， 200rpm震荡16h进行富集培养；取1.5ml上述的富集培养液，涂布于12cm直径的改良察氏培养基平板上（培养基厚度0.5cm），存留于超净工作台晾干后，按上述方法重复涂布两次，待晾干后至于培养箱28℃暗培养；3-4天后待菌丝体布满整个平板，取出接种。

6.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的按等量接种方法接入是指在每个接种时期，菌丝体如权利要求5所述培养后，将每个平板的培养物（与培养基一起）等量分成八份，于每穴花生的主根5-10cm深处接入一份培养物，以达到等量接入且土壤扩繁的目的。

7.一种花生种质资源果腐病抗性鉴定的方法，其特征在于：所述的掩埋喷灌方法是指如权利要求6所述接入等量培养物后，掩埋盖土，之后于垄上两行花生之间开沟10-15cm深，采用喷灌方式浇水，一个小区需水6L,保证水量尽可能均匀，如此，满足菌丝体的土壤扩繁需求。