[发明专利]一种毛枝柳组培快繁的方法

权利要求书

1.一种毛枝柳组培快繁方法，包括如下几个步骤：

采毛枝柳嫩茎为外植体，依次进行1)嫩茎消毒、2)嫩茎诱导培养、3)丛生芽增殖培养、4)丛生芽生根培养、5)炼苗移栽，组培苗出瓶上盆。

2.根据权利要求1所述毛枝柳的组培快繁方法，其特征在于：所述1)嫩茎消毒，为剪取毛枝柳植株的当年生嫩茎，流水冲洗2～3h，在超净台上用75％酒精处理30～40s，无菌水漂洗3～4次，再用0.3％升汞(二氯化汞，Mercury chloride)中消毒7min，之后无菌水漂洗3～4次，并用无菌滤纸吸去多余水分。

3.根据权利要求1所述毛枝柳组培快繁方法，其特征在于：所述2)丛生芽诱导的方法是：在无菌条件下将获得的嫩茎接种于诱导培养基上，在25±2℃，光照14～16h，pH值为5.8～6.0，光强3000lx条件下培养，接种20d后新芽开始萌发，20～30d，获得丛生芽；42d后叶片展开。

4.根据权利要求3所述的毛枝柳茎段组培快繁的方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养基是以DKW培养基为基本培养基，含有1.0mg/L的6-BA(6-苄基氨基嘌呤，benzylaminmopurine)、0.1mg/L的NAA(萘乙酸，1-Naphthaleneacetic acid)、5g/L琼脂、20g/L葡萄糖的培养基。

5.根据权利要求1所述毛枝柳组培快繁方法，其特征在于：所述3)丛生芽增殖培养，为将经过诱导培养萌发的丛生芽，接种到增殖培养基上进行继代培养，扩大丛生芽数量，并使丛生芽继续生长。

6.根据权利要求5所述的毛枝柳茎段组培快繁的方法，其特征在于，所述丛生芽增殖培养基是以DKW培养基为基本培养基，含有0.5mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、4.5g/L琼脂、20g/L葡萄糖的培养基。

7.根据权利要求1所述毛枝柳组培快繁方法，其特征在于：所述4)丛生芽生根培养基，为将经过充分继代的无根丛生芽接种到生根培养基上，使丛生芽长出不定根，并使苗继续生长。培养10d后，基部产生白色根系、培养30d毛根明显，根系发达，形成完整植株。

8.根据权利要求7所述的毛枝柳茎段生根组培快繁的方法，其特征在于：所述丛生芽生根培养基是以2/3DKW培养基为基本培养基，含有0.2mg/L的IBA(吲哚丁酸，Indole-3-Butytric acid)、4.5g/L琼脂、20g/L葡萄糖的培养基。

9.根据权利要求1所述毛枝柳组培快繁方法，其特征在于：所述5)炼苗移栽，为将形成完整根系的组培苗连瓶放入温室中炼苗2～4d，增加光照，后出瓶洗净放入干净基质中栽培，保持较高湿度。

10.权利要求1-9任一项所述的毛枝柳茎段组培快繁的方法在毛枝柳繁殖中的应用。