[发明专利]一种快速高效的农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化方法

权利要求书

1.一种快速高效的农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化方法，包括以下顺序步骤：

(1)取水稻成熟种子萌发，得到其发芽期个体；

(2)以发芽期的水稻个体为材料，横切其胚芽，将包括裸露茎尖分生组织作为遗传转化受体；

(3)以农杆菌为介导，通过真空渗透处理，将农杆菌导入茎尖分生组织细胞，使其携带目的基因的T-DNA插入植物基因组；

(4)待转化后植株长出3-4片新叶后，筛选鉴定转基因植株。

2.根据权利要求1所述的转化方法，所述种子萌发为水稻种子无需消毒处理，直接以自来水42℃浸泡露白后，37℃催芽24h。

3.根据权利要求1所述的转化方法，所述茎尖分生组织是带有完整胚根、胚乳且切除胚芽后的茎尖分生组织。

4.根据权利要求1所述的转化方法，所述步骤(3)真空渗透处理方法为将暴露出茎尖分生组织的水稻个体用AAM重悬菌液浸泡，抽真空处理。

5.根据权利要求4所述的转化方法，所述AAM重悬液重悬菌液OD₆₀₀为0.8，AAM重悬菌液中加入乙酰丁香酮和表面活性剂Silwet L-77，以促进转化效率。

6.根据权利要求1所述的转化方法，所述农杆菌为经人工改造，携带目的基因，用于植物遗传转化的根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)。

7.根据权利要求1所述的转化方法，所述水稻的品种是粳稻品种或籼稻品种。