[发明专利]一种原代B细胞急性淋系白血病细胞的体外培养方法有效
申请号: | 201410778012.7 | 申请日: | 2014-12-15 |
公开(公告)号: | CN104498435B | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 李鹏;蒋治武;唐燕来;林思妙;魏新茹 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/0735;C12N5/0775 |
代理公司: | 北京力量专利代理事务所(特殊普通合伙) 11504 | 代理人: | 宋林清 |
地址: | 510530 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 急性淋系白血病 体外培养 增殖 生物技术领域 细胞状态 肿瘤细胞 存活率 异质性 衰老 分化 缓解 应用 | ||
1.一种原代B细胞急性淋系白血病细胞的体外培养方法,其特征在于,将原代B-ALL细胞与OP9细胞共培养;
所述原代B-ALL细胞来源于B细胞急性淋系白血病病人骨髓;
所述共培养利用B-ALL培养基进行,所述B-ALL培养基成分包括:IMDM培养基、10%胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素。
2.根据权利要求1所述的体外培养方法,其特征在于,OP9细胞悬液种板长满为OP9基质细胞培养板,加入0.5-2×106/mL的B-ALL细胞悬液,使B-ALL细胞与OP9细胞充分接触。
3.根据权利要求1所述的体外培养方法,其特征在于,每两天进行半换液。
4.根据权利要求2或3所述的体外培养方法,其特征在于,密切观察更换新鲜的OP9基质细胞培养板。
5.根据权利要求2所述的体外培养方法,其特征在于,所述OP9基质细胞培养板为将稀释至0.5-2×105/mL的OP9细胞在OP9培养基培养下在培养板长满,所述OP9培养基成分包括:αMEM培养基、20%胎牛血清、2mM L-谷氨酰胺,100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素。
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