[发明专利]脂质体悬浮液及其制备方法与应用

说明书

本发明关于一种脂质体悬浮液的制备方法，其包括：提供组合物，该组合物是由磷脂化合物、胆固醇(cholesterol)或其衍生的盐类、聚乙二醇衍生物所组成的；将所述的组合物与醇类溶剂混合以形成混合物；以及，将所述的混合物以注入装置注入于热状态的水相溶液中，并混合搅拌混合物与水相溶液，以形成脂质体悬浮液。本发明通过调整注入装置的特定参数以控制脂质体的粒径(粒径小于200nm)，再经由单一孔径的滤膜进行挤压即可有效地缩小脂质体的粒径及分布，以提高脂质体用于大规模制造以及应用的可行性。

技术领域

本发明关于一种脂质体悬浮液的制备方法，尤指一种可降低粒径分布、可单一孔径过滤、且可大规模生产的脂质体悬浮液的制备方法；本发明亦关于一种由前述制备方法所制得的脂质体悬浮液，其中脂质体悬浮液的脂质体的平均粒径介于10nm至200nm，且粒径分布指数介于0.01至0.5；本发明亦关于一种前述脂质体悬浮液用于包载药物的方法及其方法所获得的含药的脂质体悬浮液。

背景技术

脂质体具有由1层以上的脂质双层所包围的内相的微细闭合小胞，可将水溶性物质保持于内相中，并将脂溶性物质保持于脂质双层中。脂质体可作为药物、化合物、遗传物质等物质的载剂，并保护包覆于内的物质以避免被体内酶破坏，并于特定的部位将所包覆的物质由脂质体中释放出来以达到传输或治疗的目的。目前临床研究认为若通过脂质体应用于药物传递，以单层脂质体(unilamellar vesicles,UVs)包载药物能有效将药物传输至肿瘤组织或肝脏细胞等，达到靶向治疗的效果。

现有技术制备脂质体的方法包括有水合法(hydration)、超声波处理法(ultrasonification)、逆相蒸发法(reverse-phase evaporation)、界面活性剂处理法(surfactant treatment)、孔挤压法(pore extrusion)以及高压均质法(high pressurehomogeni-zation)等，其中如美国专利第6596305号所揭示，其是将脂质溶于与水互溶的有机溶剂后，直接加入水相溶液中并持续搅拌，形成脂质体悬浮液。此方法所配制的脂质溶液浓度在0.03～0.8mg/ml，浓度极低不利于大规模生产，且搅拌过程须维持在高转速下(2000rpm)操作；此外需重复改变有机溶剂的比例才能筛选出最适当的脂质体粒径大小，过程繁复，所得的脂质体平均粒径大，约为200纳米(nm)至300nm。以上数项缺点如高转速、繁复过程等均不利于大规模量产制造。

如美国专利第5000887号所揭示，其是以与水互溶的有机溶剂(例如乙醇)溶解脂质，制备脂质溶液，将水相溶液慢慢加入脂质溶液中，再利用逆渗透(reverse osmosis)或是蒸发(evaporation)等方式移除脂质体悬浮液中的有机溶剂以提高水与溶剂的比例，所制得的脂质体的粒径虽小于等于300nm，但其制备方法复杂且繁琐，过程中须不断去除有机溶剂，不利于大规模生产。

如美国专利第4687661号所揭示，其是以与水互溶、非挥发性的有机溶剂(例如polyhydric alcohols、glycerin esters、benzyl alcohols等)溶解脂质，直接加入水相溶液中混合，搅拌后形成脂质体悬浮液。此专利所制得的脂质体粒径大小受混合搅拌的方式直接影响，所欲的粒径愈小，便需愈剧烈或高频率的搅拌震荡，例如：若以机械搅拌的搅拌叶片混合方式则制得大尺寸的脂质体，若使用高剪切力的方式(例如均质机)则制得脂质体的粒径较小，如需制备更小粒径的脂质体(200nm以下)，得需使用超声波或是高压均质乳化的方式才有机会达到。此方法所选用的有机溶剂虽属无毒性，但工艺中大多需要高温操作(90℃以上)才能溶解或是水合脂质，且即便制备过程处于高温，脂质于溶剂中的溶解度仍然不佳，导致后续形成的脂质体粒径偏大(平均粒径约500nm至微米(μm)不等)，且粒径分布范围广，若欲使用于临床，必须再进一步处理降低其粒径并均匀化粒径分布，此方法不仅花费大量时间且产出质量及效果不佳，亦不适合用于工业量产制备脂质体。