[发明专利]一种萨摩鲁肽的纯化方法

说明书

本发明属于药物化学技术领域，公开了一种萨摩鲁肽的纯化方法。该纯化方法包括：取待纯化的萨摩鲁肽样品，经化学键合硅胶色谱柱第一分离，以A1溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得第一次纯化物；取第一次纯化物，经化学键合硅胶色谱柱第二分离，以A2溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得萨摩鲁肽溶液；A1溶液为碳酸盐溶液；A2溶液为磷酸盐溶液；B溶液为乙腈和异丙醇的混合溶液，乙腈与异丙醇的体积之比为(8:2)～(9:1)。该纯化方法制备获得的萨摩鲁肽纯度高，显著提高了萨摩鲁肽的收率，且操作简单，有利于实现萨摩鲁肽的规模化制备。

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，特别涉及一种萨摩鲁肽的纯化方法。

背景技术

糖尿病是一种因体内胰岛素绝对或者相对不足所导致的一系列临床综合症，与遗传基因有着非常密切的关联。糖尿病的主要临床表现为多饮、多尿、多食和体重下降，以及血糖高、尿液中含有葡萄糖等。糖尿病分为四种类型：Ⅰ型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、其他类型糖尿病和妊娠期糖尿病。任何类型的糖尿病都会导致胰腺中的β细胞不能产生足量的胰岛素以降低血糖的浓度，导致高血糖症的发生。世界卫生组织2011年的报告指出全世界有3.46亿人患有糖尿病，2004年估计有340万人死于高血糖引起的疾病，超过80％的糖尿病死亡发生在低收入和中等收入国家。

Ⅱ型糖尿病，旧称非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或成人发病型糖尿病(adult-onset diabetes)，是一种代谢性疾病，其特征为高血糖，主要由胰岛素抵抗及胰岛素相对缺乏引起。其中，Ⅱ型糖尿病患者占糖尿病患者中的90％左右，其余10％主要为Ⅰ型糖尿病与妊娠期糖尿病，所以针对Ⅱ型糖尿病的药物的研发具有十分重要的意义。

针对Ⅱ型糖尿病的降糖药种类很多，胰高血糖样肽-1(GLP-1)的受体激动素是近年来研究的热点。其中，萨摩鲁肽(semaglutide)是GLP-1的受体激动素之一，该药物是由丹麦诺和诺德公司研制的。萨摩鲁肽作为一种每周使用一次的皮下注射制剂，能起到良好的降低血糖的作用，同时还具有减肥的功效，其化学表述为N^ε26-{18-[N-(17-carboxyheptadecanoyl)-L-γ-glutamyl]-10-oxo-3,6,12,15-tetraoxa-9,18-diazaoctade canoyl}-[8-(2-amino-2-propanoic acid),34-L-arginine]humanglucagon-like peptide 1(7-37)，其具有式I所示结构：

目前，萨摩鲁肽的制备方法主要为化学合成法。由于萨摩鲁肽的肽链较长、侧链含有较长的修饰、肽序中含有如Ser等合成过程中易异构化的氨基酸而导致粗肽中具有异构体杂质，所以在合成中产生的杂质较多，需要对化学合成法所得萨摩鲁肽粗肽进行进一步的纯化。然而，现有技术中萨摩鲁肽纯化方法的收率较低，导致萨摩鲁肽的纯化成为萨摩鲁肽制备工艺中的难点、萨摩鲁肽产业化的瓶颈之一。所以，需要探索一种萨摩鲁肽的纯化方法，以提高萨摩鲁肽的收率。

发明内容

有鉴于此，本发明的发明目的在于提供一种萨摩鲁肽的纯化方法。本发明提供的萨摩鲁肽的纯化方法操作简单，提高了萨摩鲁肽的收率，更有利于萨摩鲁肽的工业化大生产。

为了实现本发明的发明目的，本发明采用如下的技术方案：

本发明提供了一种萨摩鲁肽的纯化方法，其包括：

取待纯化的萨摩鲁肽样品，经化学键合硅胶色谱柱第一分离，以A1溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得第一次纯化物；

取所得第一次纯化物，经化学键合硅胶色谱柱第二分离，以A2溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得萨摩鲁肽溶液；

A1溶液为碳酸盐溶液；

A2溶液为磷酸盐溶液；