[发明专利]从酵母细胞壁中提取多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从酵母细胞壁中提取多糖的方法。

背景技术

酵母多糖是从酵母细胞壁中提取的高分子多糖复合物，有着抗炎、抗氧化、促生长、抗病毒、抗肿瘤及提高免疫力等生物活性。可以应用于饲料、食品、保健品等行业。

酵母细胞壁含有丰富的葡聚糖，甘露聚糖等多糖，但因壁厚使其不易破碎，因此，酵母细胞壁多糖制备具有一定的难度；目前，酵母多糖的提取多采用研磨法、冻融法、超声波法、高压匀质等物理方法，碱法、酸法，酸碱混合法，酶-Sevage等化学方法。但这些方法普遍存在能耗高、酸碱用量大、环境污染严重、工艺步骤多、得率较低等问题。

工业上有大量的废弃酵母，如啤酒和燃料乙醇工业中产生的废弃酵母，对这些资源的高值化利用具有重要意义。

发明内容

针对现有技术中存在不足，本发明提供了一种从酵母细胞壁中提取多糖的方法；

本发明是通过以下技术手段实现上述技术目的的。

一种从酵母细胞壁中提取多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.配制可溶性锂离子和表面活性剂水溶液的混合液作为提取液，在水浴中预热；

S2.将酵母原料悬浮于所述提取液中，于50～90℃水浴中温育，得多糖的粗提取液；

S3.将所述粗提取液用棒状工具缠绕得多糖，或离心除去细胞碎片后用乙醇沉淀法得到多糖，将所得多糖洗涤，干燥。

当多糖粗提取液粘度较大时，使用玻璃棒或其它工具缠绕可直接得多糖；当多糖粗提取液粘度较小时，离心除去细胞碎片后用乙醇沉淀法得到多糖。

在上述方案中，S1中所述锂离子取自醋酸锂或氢氧化锂，所述锂离子在混合液中的浓度为50～300mmol/L。

在上述方案中，S1中所述表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)或十二烷基硫酸钠(SDS)的一种或两种，所述表面活性剂在混合液中的质量分数为0.5～2.0％。

在上述方案中，所述酵母原料为酿酒酵母、粘红酵母、毕赤酵母、克鲁维酵母、啤酒酵母泥、燃料乙醇发酵废弃酵母泥。

在上述方案中，S2中所述酵母原料与提取液的用量为每克酵母原料加至5～20mL提取液 中。

在上述方案中，S2中所述温育时间为5～20min。

在上述方案中，S3中所述粗提取液离心除去细胞碎片的转速为4000～6000rpm。

在上述方案中，S3中所述乙醇用量为至少一倍体积的所述除去细胞碎片后的提取液，所述沉淀温度为4～25℃。

本发明提供的提取酵母细胞壁多糖的方法简单、方便，能够在短时间内完成多糖的提取，得率高、纯度高、具有规模化应用的前景。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。

实施例1

从新鲜的酿酒酵母中提取多糖：

(1)将保藏在-80℃甘油管中的酿酒酵母接入10mL YPD培养液(1％酵母膏，2％蛋白胨，2％葡萄糖)中，30℃震荡培养20h；

(2)将(1)中的培养液作为种子，接入500mL YPD液体培养基的三角瓶中，震荡培养20h，在8000rpm下离心10min，用去离子水洗涤菌体；

(3)取(2)中的5g菌体中悬浮于提前预热的100mL醋酸锂-SDS的提取液中，其中醋酸锂的浓度为50mmol/L，SDS的质量分数为1％；

(4)在70℃温育10min，每隔2.5min摇晃三角瓶，使提取液和菌体充分接触，得多糖的粗提取液。

(5)将三角瓶中的提取液转移到离心管中，5000rpm下离心10min，除去菌体碎片。

(6)将上清收集后，用1倍体积的95％乙醇在4～25℃沉淀多糖，在10000rpm离心10min，收集沉淀(多糖)，冷冻干燥，得到酵母多糖。

通过上述方法，新鲜的酿酒酵母中多糖提取率达13.5％，用苯酚硫酸法测得的多糖纯度达到85.7％。

实施例2

从燃料乙醇发酵废弃酵母中提取多糖：

(1)取10g燃料乙醇发酵废弃酵母悬浮于提前预热的200mL醋酸锂-CTAB的提取液中，其中醋酸锂的浓度为100mmol/L，CTAB的质量分数为1％；

(2)在50℃温育20min，每隔2.5min摇晃三角瓶，使提取液和菌体充分接触，得多糖的粗提取液。

(3)将三角瓶中的提取液转移到离心管中，5000rpm下离心10min，除去菌体碎片。