[发明专利]一种肠膜明串珠菌冻干制剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种肠膜明串珠菌冻干制剂及其制备方法和应用。

背景技术

明串珠菌(Leuconostoc)是一类乳品生产中重要的商业化乳酸菌株，属于革兰氏阳性菌。研究表明，明串珠菌具有调节肠道紊乱、代谢果糖生成甘露醇、合成K族维生素、水解α-半乳糖苷、产细菌素等益生功能，同时有助于形成干酪孔眼、产生风味物质。此外，明串珠菌可在糖基转移酶的作用下，利用蔗糖为底物合成右旋葡聚糖(dextran，多糖的一种)，具有增粘、稳定、乳化水体系以及持水性等特性，可见，明串珠菌的功能受到食品行业广泛的重视与认同，而明串珠菌冻干制剂的制备将进一步推动其在食品工业的应用。

真空冷冻干燥技术是将湿物料或溶液在较低的温度(一般为－10℃～－50℃)下冻结成固态，然后在真空条件下使其中的水分不经液态直接升华成气态，最终使物料脱水的干燥技术，乳酸菌可通过这种干燥技术保持较高的生理特性，并可直接投入食品生产中。为了增强菌株在冻干过程中的存活性能，除了对冻干工艺的优化外，冻干保护剂的选择也是影响乳酸菌干燥过程中细胞稳定性的重要外部因素。目前，常用的冻干保护剂有海藻糖、乳糖、蔗糖、D-山梨醇、脱脂奶粉、糊精等，而冻干工艺通常为菌种的培养、离心收集、添加保护剂制备菌体的悬浮液、预冻、真空冷冻干燥。可见，现有乳酸菌冻干制剂的制备所涉及的配方复杂(一个配方往往会涉及多种冻干保护剂)，工艺繁琐(通常需要乳酸菌预先培养收集后重悬于无菌的冻干保护液中，再经预冻、冷冻干燥获得冻干的乳酸菌制剂)，而复杂的配方和繁复的操作大大增加了活菌制剂在制备过程中被污染的风险，进而对消费者形成了潜在的威胁。此外，随着生活质量的不断提高，与我们每个人日常生活息息相关的乳酸菌制剂所采用的冻干保护剂(糊精等)的食品安全问题越来越受到消费者的重视，因此，寻找来源天然、操作简便、存活率高、保存稳定性佳的新型乳酸菌冻干制剂的制备方法将是未来乳酸菌冻干制剂制备的重要研究方向之一。

发明内容

因此，本发明为了解决目前缺乏来源天然、操作简便、益生菌存活率高、保存稳定性佳的肠膜明串珠菌冻干制剂的问题，提供了一种肠膜明串珠菌冻干制剂及其制备方法和应用。

本发明人发现，由于现有肠膜明串珠菌冻干制剂的制备所涉及的配方相当复杂，正如背景部分所述，包括海藻糖、乳糖、蔗糖、D-山梨醇、脱脂奶粉、糊精等等，由于冻干制剂的配方复杂，对植肠膜明串珠菌冻干制剂原料的安全性提出了更高的要求，同时大大增加了在制备过程中产生污染的风险，进而对消费者构成了潜在的威胁，这种现状与当前消费者日益增强的食品安全意识构成了极大的矛盾和冲突，为了解决这一矛盾，发明人对乳酸菌特别是肠膜明串珠菌的培养方式，包括培养基的选择，发酵培养的温度、时间等一系列技术参数进行了认真的分析和筛选，最终得到了本发明所述的技术方案以及所得肠膜明串珠菌冻干制剂的原料来源天然，其制备方法工艺简便，所得肠膜明串珠菌冻干制剂中菌株存活率高、保存稳定性佳的技术效果。

因此，为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之一是：一种肠膜明串珠菌冻干制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将肠膜明串珠菌(L.mesenteroides)接种于番茄汁蔗糖培养基中，所述番茄汁蔗糖培养基中蔗糖的质量百分比浓度为5-20％，其余为番茄汁，20-35℃，100-300rpm振荡培养8-48小时，获得发酵液；

(2)将步骤(1)所得发酵液的pH值调节至6.5-7.5，冷冻干燥即得。