[发明专利]设计核酸及其使用方法在审
申请号: | 201410798863.8 | 申请日: | 2011-10-03 |
公开(公告)号: | CN104531671A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
发明(设计)人: | 贾森·施伦;格雷戈里·J·西兹克维克兹;凯内齐·伊杰贝;萨伊达·尔巴施尔 | 申请(专利权)人: | 现代治疗公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12P21/02 |
代理公司: | 隆天知识产权代理有限公司 72003 | 代理人: | 吴小瑛;王芝艳 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 设计 核酸 及其 使用方法 | ||
1.在细胞内体外生产感兴趣的异源蛋白质的方法,所述方法包括在所述感兴趣的蛋白质在细胞内生产的条件下,将包含第一分离核酸的组合物引入至能够翻译蛋白的靶细胞中,其中所述第一分离核酸含有编码所述感兴趣的异源蛋白质的可翻译区和核苷修饰,其中所述感兴趣的蛋白质是免疫球蛋白,并且其中所述第一分离的核酸包括选自以下组成组的核苷酸序列:
a)SEQ ID NO:8和/或SEQ ID NO:10的核苷酸序列;
b)与a)的核苷酸序列具有至少95%同一性的核苷酸序列;
c)编码SEQ ID NO:9和/或SEQ ID NO:11的多肽的核苷酸序列;
d)与c)的核苷酸序列具有至少95%同一性的核苷酸序列;
e)编码与SEQ ID NO:9和/或SEQ ID NO:11具有至少95%同一性的多肽的核苷酸序列;以及
f)与e)的核苷酸序列具有至少95%同一性的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的方法,进一步包括自所述细胞充分纯化所述感兴趣的蛋白质的步骤。
3.权利要求1所述的方法,其中所述感兴趣的蛋白质是分泌蛋白。
4.增加细胞内感兴趣的重组表达蛋白质的体外产量的方法,所述方法包括在翻译效应蛋白在细胞内生产的条件下,将包含第一分离核酸的组合物引入至包含编码所述感兴趣的蛋白质的异源核酸的靶细胞中,从而提高细胞内重组表达蛋白质的产量,其中所述第一分离的核酸含有编码翻译效应蛋白的可翻译区和核苷修饰。
5.权利要求4所述的方法,其中所述感兴趣的蛋白质是免疫球蛋白。
6.权利要求4所述的方法,其中所述感兴趣的蛋白质是分泌蛋白。
7.权利要求4所述的方法,其中所述感兴趣的蛋白质是细胞内蛋白。
8.权利要求4所述的方法,其中所述靶细胞是哺乳动物细胞。
9.权利要求4所述的方法,其中所述靶细胞是酵母细胞。
10.权利要求4所述的方法,其中所述靶细胞是细菌细胞、昆虫细胞或植物细胞。
11.权利要求4所述的方法,其中所述翻译效应蛋白是神经酰胺转移蛋白(CERT)。
12.体外调节靶细胞内感兴趣蛋白质的水平的方法,包括步骤:
ⅰ)调节靶细胞内至少一种翻译效应分子的活性,其中所述调节包括将含有编码翻译效应蛋白的可翻译区和核苷修饰的第一分离核酸引入至靶细胞中;以及
ⅱ)培养所述细胞。
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