[发明专利]一种D型β-葡萄糖苷酶突变体及其表达质粒和重组菌在审
| 申请号： | 201410801030.2 | 申请日： | 2014-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN104726432A | 公开（公告）日： | 2015-06-24 |
| 发明（设计）人： | 施海峰;冯婷婷;刘海涛;王继峰;吴黎明;周阳 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄 糖苷酶 突变体 及其 表达 质粒 重组 | ||
1.一种重组质粒，称为pET-28a-Glu1D，其特征在于，所述重组质粒源于pET-28a，并包含有白蚁的β-葡萄糖苷酶基因的核苷酸序列，其中所述白蚁的β-葡萄糖苷酶基因的GenBank 登录号为JN565080。
2.一种D型β-葡萄糖苷酶，其特征在于，所述D型β-葡萄糖苷酶由权利要求1所述的重组质粒转入Ecoli.BL21(DE3)表达所得。
3.一种D型β-葡萄糖苷酶突变体，其特征在于，所述突变体是对权利要求2所述的D型β-葡萄糖苷酶进行定点突变得到。
4.根据权利要求3所述的一种D型β-葡萄糖苷酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列为以下任意一项所述：
(1)SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第182位的酪氨酸Y变为色氨酸W或亮氨酸L；
(2)SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第194位的甲硫氨酸M变为亮氨酸L或苯丙氨酸F；
(3)SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第244位的天冬氨酸D变为组氨酸H。
5.编码如权利要求4所述的一种D型β-葡萄糖苷酶突变体的DNA序列。
6.一种突变质粒，称为pET-28a- Glu1D-X，其特征在于，所述质粒包含有权利要求5所述的D型β-葡萄糖苷酶突变体的DNA序列，其中X为原始氨基酸-位置-突变后氨基酸。
7.一种突变体表达重组菌株，其特征在于，所述菌株包含有权利要求6所述的突变质粒。
8.一种C型β-葡萄糖苷酶突变体酶，其特征在于，所述突变体酶由IPTG诱导剂诱导权利要求7所述的突变体表达菌株获得。
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