[发明专利]一种片段缩合制备醋酸阿托西班的方法

说明书

技术领域

本发明属于制药技术领域，具体涉及一种片段缩合制备醋酸阿托西班的方法。

背景技术

醋酸阿托西班为环九肽，是一种催产素类似物，是子宫内及蜕膜、胎膜上催产素受体的竞争性拮抗剂，可剂量依赖的抑制宫缩，推迟不足月分娩，达到保胎的目的，在临床上用于治疗早产。结构如下：

在现有的醋酸阿托西班合成方法中，液相合成产生较多废液，反应时间长，每偶联一个氨基酸都需要进行纯化，后处理繁琐，收率低，不利于产业化生产。

固相合成方法中中国专利CN101314613、CN101696236、CN103980350采用Rink Amide AM Resin逐一偶联得到线性肽树脂，然后固相氧化树脂、裂解纯化得到醋酸阿托西班。中国专利CN102127146采用Rink Amide Resin，通过逐一偶联得到线性肽树脂，裂解后液相氧化得到醋酸阿托西班。

但是线性阿托西班溶解较差，液相氧化需要调试pH值，反应时间较长，氧化比较困难，效率比较低，同时，后续纯化工作非常困难。使用Rink Amide树脂羧基端氨基酸取代值不能太高，合成不经济；并且相对于2-氯-三苯甲基氯树脂价格不菲。所以本领域技术人员仍然期待以低成本高收率获得具有良好品质的产品。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有制备方法成本高，而且产品纯化困难，不易得到高纯度的阿托西班的问题，利用固液相结合片段缩合的方法制备醋酸阿托西班，提高了产率和纯度，由于采用2-氯-三苯甲基氯树脂和固相环化使得成本降低，利于大规模生产。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种片段缩合制备醋酸阿托西班的方法，固相制备阿托西班的全保护的第一肽片段序列树脂，在固相中氧化形成二硫键，然后将环化的全保护的第一肽片段序列从树脂上裂解下来；液相中环化的全保护的第一肽片段序列与H-Gly-NH₂缩合得到全保护的阿托西班；然后脱去侧链保护基得到阿托西班粗肽，纯化转盐得到醋酸阿托西班；

其中，

所述的第一肽片段序列为阿托西班序列中的第1～8位氨基酸。

上述片段缩合制备醋酸阿托西班的方法，优选包括以下步骤：

(1)固相制备阿托西班的全保护的第一肽片段序列树脂；

所述的阿托西班的全保护的第一肽片段序列为：

Mpa(Trt)-D-Tyr(Et)-Ile-Thr(tBu)-Asn(Trt)-Cys(Trt)-Pro-Orn(Boc)-OH，

(2)使用I₂或者H₂O₂为氧化剂氧化树脂，使得第1位的Mpa和第6位的Cys形成二硫键，得到环化的全保护的第一肽片段序列树脂；

(3)环化的全保护的第一肽片段序列从固相载体上裂解，去除未反应的氧化剂(I₂或者H₂O₂)；

(4)环化的全保护的第一肽片段序列与H-Gly-NH₂缩合得到全保护的阿托西班；

(5)将全保护的阿托西班裂解得到阿托西班粗品；

(6)阿托西班粗品经纯化转盐得到醋酸阿托西班。

步骤(1)中，全保护的第一肽片段序列树脂是由氨基酸依次偶联在固相载体上获得肽树脂；其中，所述的固相载体为酸敏感树脂，优选为2-氯-三苯甲基氯树脂。

步骤(1)中，固相制备阿托西班的全保护的第一肽片段序列树脂的过程中，所使用的氨基脱保护试剂为体积百分含量为20％的哌啶的DMF溶液、或者体积百分含量为1％的DBU的DMF溶液；优选体积百分含量为20％哌啶的DMF溶液。

步骤(1)中，固相制备阿托西班的全保护的第一肽片段序列树脂的过程中，所用的偶联剂为HBTU与HOBt与DIEA按摩尔比1:1:2的组合、或者DIC与HOBt按摩尔比1:1的组合、或者PyBOP与HOBt与DIEA按摩尔比1:1:2的组合。优选HBTU与HOBt与DIEA按摩尔比1:1:2的组合；待偶联的氨基酸与HOBt的摩尔比是1:1。

步骤(2)中，二硫键与氧化剂的摩尔比为1:5～10，优选1:6；溶剂为DMF或者DCM，优选为DMF。