[发明专利]一种生地脱毒组培快繁的方法

权利要求书

1.一种生地脱毒组培快繁的方法，其特征在于：按如下步骤进行：

1)培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所 含重量为：

①基本培养基：选用MS培养基，蔗糖或白糖30～40g/L，琼脂10～15g/L， 木屑3～5g/L，沙壤土10～15g/L，pH6.5～7.2；

②诱导培养基：MS中添加6-BA0.8～1.5mg/L、NAA0.15～0.5mg/L、小球 藻粉2～3g/L，75％酒精0.01～0.02mg/L；

③愈伤组织分化培养基：MS中添加6-BA2.5～3.0mg/L和NAA0.2～ 0.3mg/L；

④增殖培养基：MS中添加6-BAl.0mg/L和NAAO.5mg/L；

⑤生根培养基：1/2MS中添加IBA0.12mg/L；

2)外植体的选取与灭菌：取生地的种根，将其截成3～5cm的小段，经灭菌 处理，作为脱毒组培用的外植体；

3)诱导培养：将步骤2)灭菌处理后的种根小段接种在诱导培养基上，培养 形成愈伤组织，再将愈伤组织移植至分化培养基诱导出丛芽，形成无根组培苗、 珠芽和小块根；

4)增殖培养：将步骤3)形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在增殖培养 基上，诱导出丛芽，形成无根组培苗、珠芽和小块根；

5)生根培养：将步骤4)增殖形成的无根组培苗、珠芽和小块根接种在生根 培养基中进行生根培养；

6)移栽：当步骤5)的生根组培苗生长至3～5cm、生根珠芽0.3～0.7cm， 生根小块根直径0.5～1.0cm，移栽基质培养至成苗。

2.如权利要求1所述的一种生地脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述 的种根小段截取时，是以60°的斜截面斜切的，并用0.01％α-萘乙酸钠喷淋斜 截面。

3.如权利要求1所述的一种生地脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述 的灭菌处理是将种根小段置于5～15℃的条件下，采用紫外线消毒处理，然后浸 泡于30～35℃的75％酒精溶液中，浸泡时间为3～5min，然后用无菌水冲洗掉酒 精溶液。

4.如权利要求1所述的一种生地脱毒组培快繁的方法，其特征在于：所述 的移栽基质是泥炭：沙壤土：蛭石按体积比1：3：1配制而成。