[发明专利]一种从肠衣中提取肝素钠的方法

权利要求书

1.一种从肠衣中提取肝素钠的方法，其特征在于，采用盐解加酶解，以及二次酶解法酶解绞碎后的肠衣，用新型树脂采用正向反相两种吸附方法，吸附肝素钠，结合分级洗脱树脂法，得到不同分子量片段的肝素钠。

2.根据权利要求1所述的一种从肠衣中提取肝素钠的方法，其特征包括如下步骤：

一、新树脂的处理方法

（1）、将树脂置于较大的容器内，用清水且最好用纯水漂洗干净，抽干，用80~90%工业酒精（或无水乙醇）浸泡24小时左右，洗去树脂中的有机杂质，抽干；（酒精可回收）

（2）、用40-50℃热水反复清洗至无酒精味，抽干；

（3）、用2倍于树脂量的4%HCl溶液浸泡2~3小时，并不断地翻动，用纯水洗至近中性；

（4）、用2倍于树脂量的4%(1mol/L)NaOH溶液浸泡2小时，用纯水洗至近中性，抽干；

（5）、最后再用2倍于树脂量的4%HCl溶液浸泡3~4小时，并不断搅拌，用纯水洗至近中性，用23%(4mol/L)NaCl溶液浸泡2小时，用水洗净盐水，抽干，备用；

二、肠衣提取肝素钠

（1）将肠衣投入反应锅中，按肠衣重的5%加入胰蛋白酶，用3mol/L的NaOH溶液调pH为8~9之间，同时搅拌升温达40℃时左右，维持2.5h后，升温达60℃时，按肠衣重的2%加入NaCl固体，然后升温到90℃，调pH为6~7之间，保持10min后直接加热到沸腾，然后趁热用200目尼龙筛子过滤；

三、吸附

待滤液冷却至60℃左右时，用3mol/L的NaOH溶液调pH8～9之间，然后加入已处理好的树脂，加量为滤液量的5%，搅拌吸附6h后，静置1h，用200目尼龙筛子过滤；

整个吸附过程的pH保持8～9；

四、脱附

在树脂中加入等体积自来水漂洗数次，再用3mol/LNaCl溶液搅拌洗脱树脂2h，NaCl溶液的用量与树脂量相等；脱附后以200目尼龙筛子过滤，收集滤液；

重复脱附两次，合并几次滤液；

五、沉淀

在滤液中加入等体积乙醇，搅拌10min，然后静置12h以上；

六、脱水干燥

收集下层沉淀物，乙醇脱水3次；

将沉淀置于60℃烘箱中烘干得肝素钠粗品。