[发明专利]一种桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法在审
| 申请号： | 201410818210.1 | 申请日： | 2014-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN104560913A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 应汉杰;陈晓春;张磊;蔡家栋;陈勇;吴菁岚;周昌祝 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12R1/80 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 青霉 连续发酵 制备 核酸酶 p1 方法 | ||
1.一种桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，使用包含了维生素B类物质的发酵培养基，进行桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1。
2.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，所述的桔青霉为CGMCC No.2014。
3.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，所述的维生素B类物质为泛酸、烟酸、生物素、叶酸、维生素B1、维生素B2、吡哆醇和氰钴胺中的任意一种或几种，发酵培养基中维生素B类物质总浓度为0.001g/L～1g/L。
4.根据权利要求1或3所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，所述的发酵培养基组分如下：葡萄糖0.5～50g/L，蛋白胨0.05～5g/L，磷酸二氢钾0.01～5g/L，磷酸氢二钾0.01～5g/L，硫酸镁0.01～5g/L，氯化钙0.01～5g/L，维生素B0.001～1g/L，溶剂为水，pH5-8。
5.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，它包括如下步骤：
a桔青霉在发酵罐中发酵一段时间，待核酸酶P1酶活增长至稳定后放出一定体积的发酵液，发酵罐中留存的发酵液作为下一批发酵种子；
b通过向发酵罐补加无菌发酵培养基继续发酵培养，待酶活增至稳定后再次放出一定体积的发酵液，发酵罐中留存的发酵液作为下一批发酵种子；
c重复步骤b直至桔青霉产酶能力下降至一定程度后停止发酵。
6.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，步骤a中，所述的发酵罐体积为20L～200T；所述的发酵一段时间，时间为10～100h。
7.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，步骤a和b中，所述的酶活增长至稳定，是指酶活为3000～6500U/mL。
8.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，步骤a和b中，所述的放出一定体积的发酵液，是指放出发酵罐中发酵液体积的20％～95％的发酵液。
9.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，步骤c中，重复步骤b的次数为2～20次。
10.根据权利要求1所述的桔青霉半连续发酵制备核酸酶P1的方法，其特征在于，步骤c中，所述的桔青霉产酶能力下降至一定程度，是指核酸酶P1酶活小于3000U/mL。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司，未经南京工业大学;南京同凯兆业生物技术有限责任公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410818210.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
