[发明专利]一测多评法测定苦碟子注射液中有机酸含量

说明书

技术领域

本发明涉及中药成分分析领域，即一测多评法测定苦碟子注射液中有机酸含量。

背景技术

在现有技术中，苦碟子别名满天星，苦荬菜，主要分布于我国东北及内蒙古等地，为菊科植物抱茎苦荬菜(Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance)的当年生干燥全草，性寒，味苦、辛，具有清热解毒、排脓止痛之功效^[1]。苦碟子(碟脉灵)注射液是以苦碟子为原料提取精制而成的静脉注射液, 具有活血化瘀，改善微循环的作用^[2]。该注射液已上市多年，疗效确切。实验研究表明，苦碟子注射液化学成分比较复杂，而与其临床疗效相关的主要活性成分为有机酸类、黄酮类和核苷类成分。

苦碟子注射液（曾用名：碟脉灵注射液）列入国家药品标准产品（国药准字Z20025450），由通化华夏药业有限责任公司生产。

处方：抱茎苦荬菜1000g，制成1000ml。

制法：取抱茎苦荬菜，加水煎煮二次，第一次1小时，第二次0.5小时，合并煎液，浓缩至每1ml相当于原生药0.5g，放冷至40℃以下，在搅拌下加10%氧化钙乳调节pH值至10，放置12小时，离心，离心沉淀物称重，悬浮于5.3倍量95%乙醇中（使含醇量达80%），加50%硫酸溶液调节pH值至3－4，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加40%氢氧化钠溶液中和pH值至7.0，滤过，滤液回收乙醇，并挥尽乙醇，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药4g，置-5℃以下放置12小时以上，滤过，滤液加0.1－0.2%药用活性炭粉末，煮沸15分钟，置-5℃以下放置24小时以上，滤过，滤液加注射用水稀释至规定量，调节pH值至7.0－7.5，滤过，灌封，灭菌 ，即得。性状：本品为浅黄棕色至黄棕色的澄明液体。

含量测定：含量测定：本品每10ml含总黄酮以无水芦丁（C₂₇H₃₀O₁₆）计，不得少于4.0mg。含抱茎苦荬菜以腺苷（C₁₀H₁₂N₅O₄）计，不得少于0.025mg。

功能主治：活血止痛，清热祛瘀。用于瘀血闭阻的胸痹，证见：胸闷、心痛，口苦，舌暗红或存瘀斑等。适用于冠心病、心绞痛见上述病状者。亦可用于脑梗塞者。

用法用量：静脉滴注，一次10－40ml，一日1次；用5%葡萄糖或0.9%氯化钠注射液稀释至250－500ml后应用；14天为一疗程；或遵医嘱。

规格：每支装（1）10ml，（2）20ml，（3）40ml。

实验研究表明，苦碟子注射液化学成分比较复杂，而与其临床疗效相关的主要活性成分为有机酸、黄酮类和核苷类成分。

关于苦碟子注射液中有机酸含量测定，中国发明专利申请书公开了一种名称为“HPLC-DAD法同时测定苦碟子注射液中五种有机酸类成分含量的方法，专利申请号：201310071078.8”，具体是HPLC-DAD法同时测定苦碟子注射液中五种有机酸类成分含量的方法，其步骤如下：（1）混合对照品溶液的配制。（2）供试品溶液的配制。（3）测定法: HPLC-DAD法。色谱条件：色谱柱：Diamonsil C₁₈ (2) ；柱温：40℃；检测波长： 325 nm；流速：1 mL·min^-1；进样量：10 μL；流动相：乙腈，0.1％甲酸水；梯度洗脱条件：0-15 min，9%乙腈线性增加至11%，15-16 min线性增加至18%乙腈，16-30 min线性增加至20%乙腈，30-40 min线性增加至49%乙腈，其缺点是测定时需要五种有机酸的对照品，部分对照品价格较高，且该方法检验周期长，测定操作复杂，难以满足产品质检和生产过程质控高通量样本测定的要求。

发明内容

本发明的目的是针对上述不足而提供一种一测多评法测定苦碟子注射液中有机酸含量。以苦碟子注射液中有效活性成分且含量较高的菊苣酸作为内标物，计算校正因子，对碟子注射液中单咖啡酰基酒石酸、绿原酸、咖啡酸成分含量进行计算，可同时测定注射液中4种有机酸成分的含量，可实现科学、灵敏、快速地监控工业生产中苦碟子注射液的质量，同时可解决因对照品缺乏而无法客观合理地控制苦碟子注射液质量的问题。

本发明的技术解决方案是：一测多评法测定苦碟子注射液中有机酸含量，其特征在于步骤如下：

（1）色谱条件：