[发明专利]一种制备恩拉霉素精粉的方法

权利要求书

1.一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：

步骤如下：

（1）恩拉霉素发酵液先升温至70℃，灭活30min，灭活后降温至40-45℃，再依次添加两种絮凝剂进行絮凝，处理完的发酵液进行板框过滤收集恩拉霉素菌丝体；

（2）恩拉霉素菌丝体用菌丝体浸提液进行浸提得到恩拉霉素浸提液；

（3）将恩拉霉素浸提液经大孔弱酸性阳离子交换树脂吸附，用0.5mol/L盐酸水溶液处理树脂，并平衡柱子，用2mol/L氢氧化钠溶液将恩拉霉素浸提液的pH值调至5.5，以1ml/min速率上样，待流出液pH为5.3时不再上样，改用2个柱体积的pH5.5的水溶液平衡柱子，再用0.5mol/L盐酸水溶液洗脱，收集洗脱液；

（4）将滤液通过真空浓缩的方式去除丙酮和过多的水分，温度控制在50-90℃，浓缩至滤液原体积的1/30-1/10，收集浓缩液；

（5）用碱溶液将浓缩液的pH值调至7-9，得到恩拉霉素晶体；

（6）反复用无菌纯水和丙酮洗涤除去杂质，再干燥，即得恩拉霉素精粉。

2.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：步骤（1）中第一种絮凝剂为质量浓度为0.5%的壳聚糖溶液，用量为每立方米恩拉霉素发酵液添加0.5kg壳聚糖溶液；第二种絮凝剂为质量浓度为0.1%的聚丙烯酸钠溶液，用量为每立方米恩拉霉素发酵液添加0.05-0.08kg聚丙烯酸钠溶液。

3.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：步骤（2）中菌丝体浸提液为有机溶剂与盐酸溶液按比例混合的溶液，有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮中的一种，菌丝体浸提液的体积比为有机溶剂：盐酸：水=20:1:21，菌丝体浸提液用量为菌丝体重量的10-30倍。

4.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：步骤（3）中大孔弱酸性阳离子交换树脂为724型、D113型、D152型中的一种。

5.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：步骤（5）中碱溶液为2mol/L氢氧化钠溶液、2mol/L氢氧化钾溶液、氨水中的一种或几种。

6.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：步骤（6）的干燥过程为自然干燥、冻干或加热烘干中的一种，其中加热烘干温度不超过50℃。

7.如权利要求1所述的一种制备恩拉霉素精粉的方法，其特征为：

步骤如下：

（1）恩拉霉素发酵液先升温至70℃，灭活30min，灭活后降温至42℃，再依次添加两种絮凝剂进行絮凝，处理完的发酵液进行板框过滤收集恩拉霉素菌丝体；

（2）恩拉霉素菌丝体用菌丝体浸提液进行浸提得到恩拉霉素浸提液；

（3）将恩拉霉素浸提液经大孔弱酸性阳离子交换树脂吸附，用0.5mol/L盐酸水溶液处理树脂，并平衡柱子，用2mol/L氢氧化钠溶液将恩拉霉素浸提液的pH值调至5.5，以1ml/min速率上样，待流出液pH为5.3时不再上样，改用2个柱体积的pH5.5的水溶液平衡柱子，再用0.5mol/L盐酸水溶液洗脱，收集洗脱液；

（4）将滤液通过真空浓缩的方式去除丙酮和过多的水分，温度控制在70℃，浓缩至滤液原体积的1/20，收集浓缩液；

（5）用碱溶液将浓缩液的pH值调至8，得到恩拉霉素晶体；

（6）反复用无菌纯水和丙酮洗涤除去杂质，再干燥，即得恩拉霉素精粉；

步骤（1）中第一种絮凝剂为质量浓度为0.5%的壳聚糖溶液，用量为每立方米恩拉霉素发酵液添加0.5kg壳聚糖溶液；第二种絮凝剂为质量浓度为0.1%的聚丙烯酸钠溶液，用量为每立方米恩拉霉素发酵液添加0.07kg聚丙烯酸钠溶液；

步骤（2）中菌丝体浸提液为有机溶剂与盐酸溶液按比例混合的溶液，有机溶剂为丙酮，菌丝体浸提液的体积比为有机溶剂：盐酸：水=20:1:21，菌丝体浸提液用量为菌丝体重量的20倍；

步骤（3）中大孔弱酸性阳离子交换树脂为D113型；

步骤（5）中碱溶液为2mol/L氢氧化钠溶液；

步骤（6）的干燥过程为加热烘干，其中加热烘干温度不超过50℃。