[发明专利]荸荠提取6-甲基圣草酚的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种6-甲基圣草酚的提取分离方法，特别是涉及一种从荸荠皮中提取分离6-甲基圣草酚的方法。

背景技术

6-甲基圣草酚(6-Methyleriodictyol)，化学名为(-)-(S)-6-甲基-5,7,3′,4′-四羟基二氢黄酮，淡黄色粉末，为圣草酚的C-甲基化衍生物。该类圣草酚的衍生物具有抗氧化、抗炎、镇痛等多种药理活性以及利尿、改善糖尿病及糖尿并发症的作用，在食品上抗用作抗氧化剂。学者Barton,G.M.曾于1968年从松科植物花旗松的树根中分离得到6-甲基圣草酚及其衍生物。目前，没有发现其他有关6-甲基圣草酚制备的技术文献。

荸荠(Eleocharis tuberosa)，又称马蹄，属莎草科多年生浅水草本植物荸荠的地下球茎，我国大部分地区都有栽培。其中，广西荸荠产量占全国70％，贺州荸荠产量占广西70％。据文献报道，荸荠有抗菌、抗肿瘤、防治呼吸道疾病、利肠通便和利尿排淋等作用；临床上可用于治疗咽喉疼痛、痰热咳嗽、热病烦渴、小便不利、痢疾等症。研究表明，荸荠的活性物质主要富集在果皮和果肉之间。在荸荠加工过程中，被丢弃的荸荠皮质量约占新鲜荸荠质量的25％，资源非常丰富。我们在研究中发现荸荠皮中含有6-甲基圣草酚，但目前未见从荸荠皮中提取分离该化合物的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于：提出一种荸荠提取6-甲基圣草酚的方法。

本发明的荸荠提取6-甲基圣草酚的方法，应用常规提取法和色谱技术从荸荠皮中提取分离6-甲基圣草酚，具体步骤如下：

(1)将新鲜的荸荠皮风干，粉碎，备用；以重量计，称取荸荠皮粉末1份，加入提取罐中，每次加入4-10份70％体积百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，过滤，合并滤液，减压浓缩至膏状，获得提取物。

(2)以重量计，将提取物1份分散在5份水中制成悬浊液，用1-2倍水体积的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至干，获得萃取物。

(3)往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发至干，装柱，连接MCI柱进行中压分离，以40-100％体积百分比的甲醇水溶液为流动相梯度洗脱，薄层色谱法检测，收集合并流动相浓度为65-69％百分比的洗脱液，减压浓缩，获得粗品A。

(4)往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发至干，转入聚酰胺色谱柱进行分离，用体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脱，薄层色谱法检测，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脱液，减压浓缩，获得粗品B。

(5)以重量计，将粗品B1份溶于4-8份甲醇中，加入等体积的水制成悬浊液，用Sephadex LH-20凝胶色谱柱纯化，用甲醇洗脱，薄层色谱法检测，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脱液，减压浓缩，获得粗品C。

(6)将所得粗品C经硅胶柱色谱层析，用体积比为9:1-7:3的氯仿-丙酮洗脱，收集合并含有6-甲基圣草酚的洗脱液，减压浓缩，干燥，获得含量达95％ 以上的6-甲基圣草酚产品。

所述步骤(3)中的所述的MCI柱规格为70×460mm，填充材料为MCI-gel CHP-20P，柱色谱条件为：柱压为80Psi，流动相流速为50mL/min，检测波长为245nm；所述的流动相为40-100％体积百分比的甲醇水溶液。

所述步骤(4)中所述的聚酰胺，规格为200-300目；所用洗脱液为体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。 

本发明与现有技术相比其有益效果是：设计科学合理，开辟了从天然植物中提取分离6-甲基圣草酚的新途径，分离效果好，产品纯度高，使一贯被视为废弃物的荸荠皮变废为宝，所选用的层析材料MCI、聚酰胺和凝胶均可反复使用，原料易得，资源丰富，生产成本低，可进行规模化生产，满足医药工业需要。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明的实施方式不限于此。

本发明的荸荠提取6-甲基圣草酚的方法，应用常规提取法和色谱技术从荸荠皮中提取分离6-甲基圣草酚，具体步骤如下：

(1)将新鲜的荸荠皮风干，粉碎，备用。称取一定质量(g)的荸荠皮粉末加入提取罐中，再加入4-10倍体积(mL)的70％体积百分比的丙酮水溶液，在25℃下浸泡24h，浸泡3次，过滤，合并滤液，减压浓缩至膏状，获得提取物。

(2)将提取物(g)分散在5倍体积(mL)的水中制成悬浊液，用1-2倍水体积的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至干，获得萃取物。