[发明专利]抑制MYD88基因的寡聚核酸及其应用

说明书

本发明公开了抑制MYD88基因的寡聚核酸，所述寡聚核酸为双链RNA，所述寡聚核酸的碱基组成为：所述寡聚核酸的碱基组成为：包括有(1)含有SEQ.ID NO.12所示的70％以上同源的反义链；(2)含有与(1)所述反义链反向互补配对的寡聚核酸的50％以上序列同源的正义链；且(3)所述正义链和所述反义链经过退火后能形成双链结构。并公开了含有上述寡聚核酸的DNA、载体、组合物及其应用。本发明提供了一类对MYD88有显著抑制作用的寡聚核酸，该寡聚核酸能在动物实验中实现抑制炎症作用，显著降低多种炎症因子，是一种十分有前景的炎症治疗药物。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体是涉及一类抑制MYD88基因的寡聚核酸及其应用。

背景技术

骨关节炎(OA)是世界上致残的重要原因之一，大约多于10％的老年人有骨关节炎的症状。风湿性关节炎(RA)是一个慢性炎症疾病，影响着世界上约0.5％到1％的成年人，通常导致关节损坏并危及生活质量。多种炎性细胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6等参与了RA和OA的发病和进展，其通过激活免疫细胞及诱导金属蛋白酶产生而促进关节破坏、滑膜炎、血管增生等。

MYD88是一种胞质可溶性蛋白，其由TLRs(TLR3除外)激活，是TLRs信号转导通路中最主要的接头蛋白。现有研究显示TLRs在类风湿关节炎发病及进展中发挥重要作用，而髓样分化因子MYD88作为TLRs通路中的核心蛋白，其在类风湿关节炎发病中的作用也日渐突出。研究表明MYD88不但在促进炎性细胞因子过表达中发挥重要作用，也能促进T细胞增殖和启动先天性免疫应答和适应性免疫应答。

在过去的20多年里，大多数新型治疗方法的研发工作是关于疾病缓解的抗关节炎药物(DMARDs)和疾病缓解的抗风湿性关节炎的药物(DMOADs)。到目前为止，制药业在研制有效安全的疾病缓和性药物(DMOADs)上并不成功，致使成千上万的病人仍受到该严重致残性疾病所带来的痛苦。随着新途径和给药方法的应用，在该治疗领域预期将有更多的发展，开发出可阻断、逆转疾病过程并缓和疾病的药物。

1998年克雷格·梅洛和安德鲁·法尔发现了基因沉默现象，随后Tuschl和他的同事在哺乳动物细胞中发现化学合成的19－25个碱基的小干扰RNA(siRNA)，可特异高效的沉默靶mRNA。从此siRNA被广泛用于基因功能研究，疾病治疗。siRNA可特异的同序列互补的靶mRNA结合，并使其降解。长片段的双链RNA被Dicer酶切割成21－23个碱基长度短片段RNA。两条链中同靶mRNA结合的链称为反义链，另一条链称为正义链或信使链。体外化学合成的siRNA进入细胞后同样发挥RNA干扰作用，而且有效降低了长链RNA引起的免疫反应。但针对同一基因不同片段位置可设计出多种siRNA，沉默效果有明显差异。

在本发明中，我们提供一种全新的siRNA作为关节炎及相关炎症的治疗药物；一种通过骨关节腔局部注射siRNA及其制剂抑制炎症因子表达的方法，实现了对关节炎及相关炎症的治疗作用。

发明内容

本发明目的旨在提供一类抑制MYD88基因表达的寡聚核酸。

实现上述目的的技术方案如下。

一类抑制MYD88基因的寡聚核酸，所述寡聚核酸为双链RNA，所述寡聚核酸的碱基组成为：

包括有(1)含有SEQ.ID NO.12组成的70％以上同源的反义链；(2)含有与(1)所述反义链反向互补配对的寡聚核酸的50％以上序列同源的正义链；且

(3)所述正义链和所述反义链经过退火后能形成双链结构。

在其中一个实施例中，所述寡聚核酸包括有(1)由SEQ.ID NO.12碱基序列所示的反义链；(2)含有SEQ.ID NO.11所示至少50％序列同源构成的正义链；且(3)所述正义链和所述反义链经过退火后能形成双链结构。