[发明专利]用于检测鲍曼不动杆菌的LAMP试剂盒及其专用引物

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域中细菌的分子生物学检测方法，特别是涉及一种鲍曼不动杆菌的LAMP试剂盒及其专用引物与其在检测鲍曼不动杆菌中的应用。

背景技术

鲍曼不动杆菌临床感染及治疗现状

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，Ab)是一种非发酵、需氧的革兰阴性杆菌，属于不动杆菌属(Acinetobacter)。鲍曼不动杆菌主要存在于医院环境中，是医院获得性肺炎和呼吸机相关性肺炎的主要致病菌之一，特别是重症监护病房的患者，感染鲍曼不动杆菌的机率更高，这与患者免疫力低下、患严重基础性疾病、接受呼吸机等侵入性治疗以及大量使用广谱抗菌药物关系密切。此外，有研究表明，医院公共设施的污染，特别是呼吸机、静脉导管等的污染，通过医务工作者手的交叉感染，是导致医院获得性鲍曼不动杆菌感染的主要因素。

鲍曼不动杆菌的可怕之处在于它不仅曾引起世界范围内的多次爆发流行，更因其不断增加的耐药性使广大临床工作者束手无策。鲍曼不动杆菌曾经对青霉素、头孢菌素、氨基糖苷类、喹诺酮类抗生素等均敏感，但随着广谱抗生素和免疫抑制剂的广泛使用等原因，世界各地鲍曼不动杆菌泛耐药菌(pan-drug resistant Acinetobacter baumannii，PDR-AB)或多重耐药菌(multi-drug resistant Acinetobacter baumannii，MDR-Ab)的报道层出不穷，甚至对之前一直有较好治疗效果的亚胺培南(Imipenem，IP)和美罗培南(Meropenem，MP)等碳青霉烯类抗生素耐药性的菌株亦屡见不鲜。一些较新的抗菌药物如多粘菌素、替加环素等亦出现了耐药性报道。

因此，快速准确诊断病原菌，予以规范合理的抗生素治疗，是控制鲍曼不动杆菌感染的有效措施。

LAMP技术介绍

环介导恒温核酸扩增技术(1oop-mediated isothermal amplification，LAMP)是由Notomi(Notomi T,et al.Loop-mediated isothermal amplification of DNA.Nucleic Acids Res 2000；28(12):63.)发明的一种新型基因扩增技术。具体方法是针对靶基因(DNA或者cDNA)的6个区域，设计4-6种特异引物，利用链置换DNA聚合酶，在等温条件下进行基因扩增反应，结果直接靠扩增副产物焦磷酸镁的沉淀浊度进行判断。LAMP技术具有快速高效、特异性强、灵敏度高、操作简单、检测直观和设备要求低等特点。