[发明专利]一种鲫鱼疱疹病毒病JDORF25疫苗及制备方法和应用有效
| 申请号： | 201410841189.7 | 申请日： | 2014-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN104593388A | 公开（公告）日： | 2015-05-06 |
| 发明（设计）人： | 周勇;曾令兵;范玉顶;徐进;马杰 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/38 | 分类号： | C12N15/38;C12N1/19;C07K14/03;A61K39/245;A61P31/22;C12R1/84 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430223 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鲫鱼 疱疹病毒 jdorf25 疫苗 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种分离的基因，其序列为SEQ ID NO.1所示。
2.含有权利要求1所述基因的毕赤酵母。
3.一种分离的基因工程菌，其特征在于：巴斯德毕赤酵母Km71/CyHV-2-25 Pichia pastoris Km71/CyHV-2-25，CCTCC NO：M2014570。
4.权利要求3所述菌株制备的蛋白。
5.一种制备鲫鱼疱疹病毒病疫苗的方法，具体如下：
将巴斯德毕赤酵母Km71/CyHV-2-25 Pichia pastoris Km71/CyHV-2-25 接种到100mL BMGY培养基中，30℃、250r/min振荡培养至OD600值达6左右，室温1500g离心5 min，20mL BMMY培养基重悬菌体，所得菌液转入100mL的摇瓶，封瓶膜封口，加入100%甲醇至终浓度0.5%，于30℃、250r/min的条件下诱导培养，每24h补加甲醇，使甲醇浓度维持0.5%；
连续诱导3天后，通过离心去除诱导液中的酵母菌，上清经过低温冷冻干燥和his纯化的方式进行浓缩纯化，即得鲫鱼疱疹病毒病疫苗，该疫苗为纯化的蛋白，蛋白序列为SEQ ID NO.2所示。
6.权利要求3所述的菌株在制备鲫鱼疱疹病毒病疫苗中的应用。
7.权利要求1所述基因编码的蛋白在制备鲫鱼疱疹病毒病疫苗中的应用。
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