[发明专利]一种林蛙油抗氧化多肽

权利要求书

1.一种林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，所述林蛙油抗氧化多肽由包括以下步骤的方法制备而成：

1)取林蛙油，去除筋膜，加入2～10倍于林蛙油体积的水，置于2～4℃泡发8～12h，得林蛙油溶液；

2)调节步骤1)所得林蛙油溶液的pH值为1.6～1.8，加入0.1～0.3g/ml胃蛋白酶，在35～40℃下充分酶解，得胃蛋白酶解液；

3)调节将步骤2)所得胃蛋白酶解液的pH值为6.0～7.0，加入0.2～0.4g/ml中性蛋白酶，在45～55℃下充分酶解，得中性蛋白酶解液；

4)调节步骤3)所得中性蛋白酶酶解液的pH值为7.0～8.0，加入0.2～0.4g/ml菠萝蛋白酶，在55～60℃下充分酶解，得菠萝酶解液；

5)将步骤4)所得菠萝酶解液加热至70～75℃，静置10～15min，使酶灭活，得酶解液；

6)取步骤5)所得酶解液，使用0.3～0.4μm的滤膜过滤，收集滤液，再使用截留分子量为4～5kD的超滤膜过滤，收集滤液，加入活性炭室温低速搅拌1～3h后，过滤除去活性炭，真空浓缩，喷雾干燥，即得林蛙油抗氧化多肽。

2.根据权利要求1所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤2)所述胃蛋白酶的比活为3000～5000U/g。

3.根据权利要求2所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤2)所述酶解的时间为4～5h。

4.根据权利要求1所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤3)所述中性蛋白酶的比活为40000～70000U/g。

5.根据权利要求4所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤3)所述酶解的时间为3～4h。

6.根据权利要求1所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤4)所述菠萝蛋白酶的比活为600000～900000U/g。

7.根据权利要求6所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，步骤4)所述酶解的时间为2～3h。

8.根据权利要求1所述的林蛙油抗氧化多肽，其特征在于，所述林蛙油抗氧化多肽由包括以下步骤的方法制备而成：

1)取林蛙油，去除筋膜，加入2～10倍于林蛙油体积的水，置于2～4℃泡发8～12h，得林蛙油溶液；

2)调节步骤1)所得林蛙油溶液的pH值为1.6～1.8，加入酶的比活为3000～5000U/g的0.1～0.3g/ml胃蛋白酶，在35～40℃下酶解4～5h，得胃蛋白酶解液；

3)调节将步骤2)所得胃蛋白酶解液的pH值为6.0～7.0，加入酶的比活为40000～70000U/g的0.2～0.4g/ml中性蛋白酶，在45～55℃下酶解3～4h，得中性蛋白酶解液；

4)调节步骤3)所得中性蛋白酶酶解液的pH值为7.0～8.0，加入酶的比活为600000～900000U/g的0.2～0.4g/ml菠萝蛋白酶，在55～60℃下酶解2～3h，得菠萝酶解液；

5)将步骤4)所得菠萝酶解液加热至70～75℃，静置10～15min，使酶灭活，得酶解液；

6)取步骤5)所得酶解液，使用0.3～0.4μm的滤膜过滤，收集滤液，再使用截留分子量为4～5kD的超滤膜过滤，收集滤液，加入活性炭室温低速搅拌1～3h后，过滤除去活性炭，真空浓缩，喷雾干燥，即得林蛙油抗氧化多肽。