[发明专利]一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于：其包括以下步骤：

1）制备禽流感抗原：将低免鸡胚清洗消毒，经过孵化后，在其尿囊腔接种H9N2亚型HP株禽流感病毒，然后继续孵化，在无菌条件下收获鸡胚液，并进行纯化浓缩得到新的鸡胚液，并且新的鸡胚液满足禽流感病毒含量≥10^8.7EID₅₀/0.1mL，接着将新得到的鸡胚液用甲醛进行灭活；

2）制备新城疫灭活抗原与禽流感灭活卵黄抗体：先用H9N2亚型HP株禽流感病毒灭活疫苗免疫鸡胚，检测鸡胚H9N2亚型抗体水平，选择出HI效价达到9log2以上的高免鸡胚；然后将选出的禽流感病毒高免鸡胚进行清洗消毒，并进行孵化；在经孵化后的高免鸡胚尿囊腔内接种新城疫病毒LaSota株接着孵化，分别在无菌条件下收获鸡胚液和卵黄液，并进行纯化浓缩，得到新的鸡胚液和卵黄液，并且新得到的鸡胚液满足新城疫病毒含量≥10^8.9EID₅₀/0.1mL，卵黄液满足卵黄抗体HI值≥9log2，接着将新得到的鸡胚液和卵黄液用甲醛灭活；

3）乳化：将已灭活的新城疫抗原、禽流感抗原以及禽流感卵黄抗体半成品分别进行乳化，调节新城疫、禽流感抗原乳化剂的HLB值为3～6得到油相，再令水相：油相等于1:3；调节卵黄抗体乳化剂的HLB值为6～10得到油相，再令水相：油相等于1:1.5；

4）混合：将乳化后的新城疫抗原、禽流感抗原和卵黄抗体按1.5～3:1.5～3:1比例混匀，得到产品。

2.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中非免鸡胚清洗消毒后孵化所需的温度为37℃，并且需孵化至9～10日龄；接种过H9N2亚型HP株禽流感病毒的鸡胚继续孵化所需的温度为37℃，并且孵化所需时间为24～96h。

3.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤２）中经清洗消毒后的禽流感高免鸡胚孵化所需的温度为37℃，并且需孵化至９～10日龄。

4.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于：所述步骤２）中接种新城疫病毒LaSota株后的鸡胚孵化所需的温度为37℃，并且孵化所需时间为60～96h。

5.利用权利要求1～4任一所述的鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法制得的新型鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物灭活疫苗。