[发明专利]一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物灭活疫苗及其制备方法有效
申请号: | 201410848495.3 | 申请日: | 2014-12-31 |
公开(公告)号: | CN104984337B | 公开(公告)日: | 2018-08-21 |
发明(设计)人: | 吴润生;包松英;林拱阳 | 申请(专利权)人: | 福州大北农生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K39/42 | 分类号: | A61K39/42;A61P31/14;A61P31/16;A61K39/17;A61K39/155 |
代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
地址: | 350000 福建省*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 禽流感抗原 制备 抗体复合物 鸡新城疫 禽流感 卵黄抗体 灭活抗原 灭活 疫苗 节约生产成本 新城疫抗原 灭活疫苗 疫苗免疫 新城疫 雏鸡 抗原 病鸡 乳化 半成品 延缓 释放 安全 | ||
本发明涉及一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗的制备方法,其包括以下步骤:制备禽流感灭活抗原、制备新城疫灭活抗原与禽流感灭活卵黄抗体,将已灭活的新城疫抗原、禽流感抗原以及禽流感卵黄抗体半成品分别进行乳化并混合。本发明提供一种能适用于所有鸡群的,特别是对雏鸡和病鸡均安全有效而且能增强疫苗免疫保护力,达到延缓抗原释放,安全性好纯度高,又能节约生产成本的一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗。
技术领域
本发明属于生物新医药领域,涉及一种鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物疫苗及其制备方法。
技术背景
新城疫(Newcastle Disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的鸡和多种禽类的急性高度接触性的传染病,具有很高的发病率和病死率。禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的,发生于各种家禽和野鸟的急性传染病。引起禽流感的A型流感病毒叫做禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV),该病已呈全球性分布,许多国家和地区都有该病发生的报道,全球性的禽流感大流行已出现多次,给养禽业带来了沉重的打击。
目前,防治ND与AI的主要手段为疫苗免疫,并辅助抗生素和抗病毒药物治疗。但缺点是人工接种劳动强度大并且家禽对免疫接种的应激反应大,因此研究和应用二联疫苗和多联疫苗已经成为兽用疫苗产业发展的必然趋势。
禽流感病毒容易发生变异,因此不能使用弱毒活疫苗。灭活疫苗主要刺激机体产生体液免疫,动物机体受到抗原物质的刺激后,由B淋巴细胞转化为浆细胞产生能与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白,即特异性抗体。而鸡的法氏囊是B淋巴细胞发生和分化重要场所,而雏鸡的法氏囊发育尚不完全,发生和分化B淋巴细胞的能力有限,因此现有的多联灭活疫苗对于雏鸡的免疫效率不高。而采用高免的特异性卵黄抗体,可使雏鸡获得被动免疫,是雏鸡度过禽流感免疫空白期的有效手段。因此,研制出一种既能提供被动免疫,又能提供主动免疫的新型禽流感抗原抗体复合物二联或多联疫苗意义重大。
抗原抗体复合物疫苗已经被国内外学者关注,并进行了相关研究。目前,鸡新城疫和传染性法氏囊病等禽病的复合物疫苗研究已经取得一定成果。何宏轩(专利号:ZL200810226023.9)制备了一种禽流感抗原抗体复合物,但其使用的种毒为禽流感H5N1亚型病毒,且免疫效果与常规疫苗差异并不显著。孙瑞芹在《禽流感病毒抗原-抗体复合物的制备及其免疫原性》(孙瑞芹等,中国生物制品学杂志,2009年第22卷第6期第588页)一文中公开了以H5亚型禽流感病毒 的HA蛋白为抗原,其病毒的高免卵黄为抗体,将抗原与抗体按不同比例混合,制备禽流感病毒抗原抗体复合物疫苗的方法,其抗体水平与攻毒保护力与H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗相比无明显提高。原因是其卵黄抗体效价不高,剂量不够,不足以提供坚强的被动免疫。另外在疫苗中添加卵黄抗体直接增加疫苗生产成本,肉鸡经济价值不高,昂贵的疫苗难以被接收。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能适用于所有鸡群的,特别是对雏鸡和病鸡均安全有效而且能缩短疫苗免疫空白期,增强疫苗保护力,降低疫苗生产成本的鸡新城疫、禽流感抗原抗体复合物灭活疫苗及其制备方法。
为了能够实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
本发明的制备方法包括以下步骤:
1)制备禽流感抗原:将非免鸡胚清洗消毒,经过孵化后,在其尿囊腔接种H9N2亚型HP株禽流感病毒,然后继续孵化,在无菌条件下收获鸡胚液,并进行纯化浓缩得到新的鸡胚液,并且新的鸡胚液满足禽流感病毒含量≥108.7EID50/0.1mL,接着将新得到的鸡胚液用甲醛灭活;
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