[发明专利]一种低分子量蜂花粉蛋白肽及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种低分子量蜂花粉蛋白肽及其制备方法，属于生物技术领域。

背景技术

花粉是植物的雄性细胞，是植物的“精子”。蜜蜂采集回巢的花粉，称为蜂花粉。蜂花粉中除含有一般花粉的成分外，还含有蜜蜂在采集进加进去的少量花粉蜜与分泌物，因此蜂花粉与一般花粉的成分略有差异。其外观形状也不同于粉末状的花粉粒，而是经蜜蜂加工过的多为扁圆形的花粉团。花粉粒直径多在10－50微米之间，花粉粒表面有各种不规则的沟纹，并有明显的萌发孔。

现有蜂花蛋白肽主要是通过酶解花粉而获得，如以蜂花粉为原料,将蜂花粉破壁、脱脂，加入蛋白酶进行酶解反应，所得酶解物具有抗氧化等作用,可制成粉剂、片剂、胶囊、冲剂等。但这种酶解产物产率低，蛋白功效较差，而且较易引起过敏。

发明内容

本发明第一目的是提供一种低分子量蜂花粉蛋白肽的制备方法，所得蜂花粉蛋白肽分子量低、色泽均一，可用于食品、药品、化妆品和保健品中。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种低分子量蜂花粉蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：

1)将破壁蜂花粉加入稀盐酸溶液中，再加入胃蛋白酶，35-38℃下反应3～5h，得到体系1；

2)将体系1的pH值调至6.0～8.0，加入中性蛋白酶，48-51℃反应2～3h，得到体系2；

3)维持体系2的pH值不变，加入菠萝蛋白酶，53-56℃反应3～5h，再升温至88-90℃，维持10～20min，得到体系3；

4)将体系3进行抽滤(抽滤膜孔径0.45μm)，所得滤液经脱苦脱色、真空浓缩、喷雾干燥，得到蜂花粉蛋白肽。

本发明通过胃蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶三步酶解法，对破壁蜂花粉进行酶解，可以获得分子量在3000Da以下的低分子量蜂花粉蛋白肽。

其中，所述破壁蜂花粉与稀盐酸的质量体积比为1：5～15(g/mL)，所述稀盐酸质量体积百分数为0.2～0.4％；

其中，所述胃蛋白酶的活力单位为2500～4000u/g；胃蛋白酶：破壁蜂花粉的质量比为0.25～0.3:100；

其中，所述中性蛋白酶的活力单位为3万～6万u/g；中性蛋白酶：破壁蜂花粉的质量比为0.45～0.5:100；

其中，所述菠萝蛋白酶的活力单位为40万～80万u/g；萝蛋白酶：破壁蜂花粉的质量比为0.8～1:100；

其中，所述脱苦脱色是指在滤液中加入活性炭，室温下搅拌1-3h后，过滤除去活性碳的过程。

作为本发明优选的实施方式，所述步骤4)中，体系3进行抽滤(抽滤膜孔径0.45μm)，所得滤液选用分子截留量为2kd的超滤膜进行超滤，收集滤液，经脱苦脱色、真空浓缩、喷雾干燥，即得蜂花粉蛋白肽。经过进一步的超滤处理，可以获得分子量小于1000Da的低分子量蜂花粉蛋白肽。

本发明第二目的是提供上述制备方法所得的蜂花粉蛋白肽。

采用本发明所述的技术方案制得的蜂花粉蛋白肽分子量低，抗氧化效果好，无异味，可用于食品、药品、化妆品和保健品中。

附图说明

图1是本发明所述蜂花粉蛋白肽制备方法的工艺流程图。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1一种低分子量蜂花粉蛋白肽制备

步骤如下：

1)取100克破壁蜂花粉加入1L浓度为0.3％的稀盐酸溶液中，再加入0.3克比活为3500u/g的胃蛋白酶，37℃反应3h，得到体系1；

2)将体系1pH值调至6.8，加入0.5克比活为5万u/克的中性蛋白酶，升温至50℃继续反应2h，得到体系2；

3)维持体系2pH值不变，加入0.8克比活为80万u/g的菠萝蛋白酶，升温至55℃反应5h，反应结束后，将体系升温至90℃，保持15min，使酶灭活，得到体系3；

4)体系3经0.45μm滤膜抽滤后，滤液直接经脱苦脱色、真空浓缩后、喷雾干燥后即得的低分子量蜂花粉蛋白肽。

实施例2一种低分子量蜂花粉蛋白肽制备

采用与实施例1相同的方法制备蜂花粉蛋白肽，区别在于：