[发明专利]溴代去甲斑蝥素单酸乙酯及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及溴代去甲斑蝥素单酸乙酯及其制备方法和应用，属于斑蝥素衍生物领域。

背景技术

斑蝥是一种昆虫体，是我国一种民间传统的中药。在斑蝥体内提取出的一种叫做斑蝥素(cantharidin，C₁₀H₁₂O₄)的物质对一些癌症有非常特别的抑制作用，针对腹水肝癌或者是原发性肝癌有特殊的抑制作用，具很高的药用价值。

斑蝥素还可以经过结构的修饰，从而合成得到很多的斑蝥素衍生物，使其毒副作用大大降低，并且还能更好地抑制癌症。比如说去甲基斑蝥素或者羟基斑蝥亚安等具有和斑蝥素类似的抗击癌症的活性，甚至斑蝥素的活性相较而言更低。在科技发展的今天，斑蝥素被广泛认识应用，优化后的斑蝥素类的衍生物不但保持了斑蝥素的抗癌活性而且使其毒性大大降低，开始被科学界所重视并研究，并且进一步成为重要的抗癌药物之一。

因为斑蝥素的毒性比较大，会对临床治疗有一定的副作用。因此当前许多的科学研究都采用去除1，2位甲基的方法合成去甲斑蝥素。又因为去甲斑鳌素是抗癌效果较好的中药，因此可以用于肝癌内注射。并且去甲斑蝥素是我国较早以前就合成的药物之一。

李太华(李太华，《两种去甲基斑蝥素衍生物的合成、¹²⁵I标记及其动物体内分布》，同位素，1998,11(2)，95-99)第一次通过溴加成方法将溴原子引入去甲斑蝥素并进行酰化衍生。所得衍生物以体外试管法,用MTT法筛选模型检测上述多种衍生物对口腔上皮癌细胞(KB)、结肠直肠细胞(HCT)、肝癌细胞(Bel)三种癌细胞的抑制率和IC50值，结果发现该化合物对癌细胞均有一定的抑制作用，同时在小白鼠的心、肝、肺、肾和脾中均有较高的浓集。

考虑到目前已经用于临床治疗的斑蝥素药物中(如斑蝥素钠，去甲斑蝥素钠等)，均以开环的方式存在，从化学结构上看，开环的化合物其相应的溶解度较大，其体内生物利用度也高。因此对斑蝥素的结构进行修饰，寻找高效低毒的斑蝥素抗肿瘤药物，具有重要的工业应用价值和广泛的市场前景。ZL201410163619.4、ZL201410163711.0、ZL201410163705.5等公开了制备去甲基斑蝥素酸盐的方法，现有技术还公开了通过溴加成反应合成5,6-二溴去甲斑蝥素的方法，但尚未有报道合成开环的5,6-二溴去甲斑蝥单酯。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种溴代去甲斑蝥素单酸乙酯及其制备方法和应用，所得到的溴代去甲斑蝥素单酸乙酯具有很好的抗肝癌效果。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

溴代去甲斑蝥素单酸乙酯，即5,6-二溴去甲斑蝥素单酸乙酯，结构式为式I：

溴代去甲斑蝥素单酸乙酯的制备方法，按照如下合成路线进行：以呋喃为原料，与顺丁烯二酸酐在有机溶剂中反应得到5,6-二氢去甲斑蝥素，5,6-二氢去甲斑蝥素在三氯甲烷中与液溴反应得到5,6-二溴去甲斑蝥素，5,6-二溴去甲斑蝥素与乙醇反应得到5,6-二溴去甲斑蝥素单酸乙酯I，

前述制备方法，具体包括以下步骤：

(1)取顺丁烯二酸酐，研细，加入有机溶剂溶解，待完全溶解后滴加呋喃，于35℃～45℃反应24h，抽滤，得白色固体产物5,6-二氢去甲斑蝥素，干燥备用；

(2)室温下，取步骤(1)中的白色固体产物，加入三氯甲烷搅拌成悬浮状，随后边搅拌边滴入三氯甲烷与液溴的混合液，再缓慢加入三氯甲烷润洗液，搅拌反应，反应结束后抽滤，用四氯化碳洗涤，得白色固体5,6-二溴去甲斑蝥素，干燥备用；

(3)取5,6-二溴去甲斑蝥素，先加入部分95％乙醇，搅拌升温至78℃时开始回流，再逐滴滴加95％乙醇，直至溶液澄清，趁热抽滤得滤液，将滤液密封，冷冻结晶，过夜，抽滤，即得白色固体5,6-二溴去甲斑蝥素单酸乙酯。

前述制备方法，也可以包括以下步骤：

(1)取顺丁烯二酸酐，研细，加入有机溶剂溶解，待完全溶解后滴加呋喃，于35℃～45℃反应24h，抽滤，得白色固体产物5,6-二氢去甲斑蝥素，干燥备用；

(2)室温下，取步骤(1)中的白色固体产物，加入三氯甲烷搅拌成悬浮状，随后边搅拌边滴入三氯甲烷与液溴的混合液，再缓慢加入三氯甲烷润洗液，搅拌反应，反应结束后抽滤，用四氯化碳洗涤，得白色固体5,6-二溴去甲斑蝥素，干燥备用；