[发明专利]一种硼替佐米中间体的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种化学领域的检测方法，特别涉及一种硼替佐米中间体的检测方法。

背景技术

硼替佐米(bortezomib),商品名：万珂(Velcade),化学名：[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪甲酰)氨基]丙基]氨基]丁基]-硼酸，分子式：C₁₉H₂₅BN₄O₄，结构式如IV所示：

硼替佐米是由美国Millennium制药公司研发的新型抗肿瘤药物，首次于2003年5月，经FDA批准上市，用于治疗复发性和难治性多发性骨髓瘤。2006年，经FDA批准用于治疗套细胞淋巴瘤；2008年，经FDA批准用于多发性骨髓瘤的一线药物。

近年，对于硼替佐米的合成方法有多种，常涉及中间体(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪羰基-L-苯丙氨酸)-L-亮氨酸硼酸酯，结构式如Ⅲ所示的化合物，脱除(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇后即得硼替佐米。

目前，暂未见硼替佐米中间体化合物Ⅲ检测方法的文献报道。但是，有效的检测出中间体和杂质，对反应控制和提高收率有着重要的作用，同时也直接影响终产品的质量。所以，很有必要提供一种有效的检测方法，对硼替佐米中间体进行质量控制。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中所存在的上述不足，提供一种硼替佐米中间体的检测方法，该方法检测的结果，峰与峰之间分离效果好，灵敏度、准确度高。

更进一步，本发明的方法是针对具体反应生成中间体(1S,2S,3R,5S)-蒎烷二醇-N-(2-吡嗪羰基-L-苯丙氨酸)-L-亮氨酸硼酸酯的检测，不仅能够有效的将硼替佐米中间体和杂质分开，而且能够跟踪反应进度。

为了达到上述目的，具体技术方案如下：

一种硼替佐米中间体的检测方法，采用高效液相色谱法，选用有机溶剂和酸的水溶液为流动相A和流动相B进行梯度洗脱，采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流速为0.8-1.2mL/min，色谱柱柱温为30-40℃，中间体样品的检测波长为270nm；

所述的流动相A为乙腈、水、甲酸的三者的混合溶剂，其中，乙腈的体积百分比为25-35％，甲酸的体积百分比为0.05-0.15％，余下的为水；

所述的流动相B为乙腈、水、甲酸的三者的混合溶剂，其中，乙腈的体积百分比为65-75％，甲酸的体积百分比为0.05-0.15％，余下的为水；

所述的流动相A和流动相B进行梯度洗脱，时间(min)/流动相A(v％)：0/55；10/0；20/0；25/55；30/55。具体如表1所示。本发明选用的流动相条件，初始采用低比例的有机相保证极性大的物质分离度符合要求，最后采用高比例的有机相保证可能存在的非极性物质能被洗脱检测。本发明方法的特点是采集时间短，能快速准确的给出反应监测结果，峰与峰之间分离效果好，基线平稳。

表1流动相梯度洗脱体积时间表