[发明专利]一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法

权利要求书

1.一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，包括：

(1)取黄芪川芎提取物细粉，精密称定，加入甲醇，35KHz～60KHz超声提取30min，过滤，滤液挥干，残渣用乙醇溶解并定容，滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)取阿魏酸对照品、洋川芎内酯I对照品、毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品、芒柄花苷对照品、毛蕊异黄酮对照品、芒柄花素对照品，精密称定，分别加入甲醇制成对照品溶液；

(3)分别精密吸取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，即得黄芪川芎提取物指纹图谱；其中，色谱条件为：色谱柱：Athena C18-WP色谱柱；柱温：25℃～40℃；检测波长：205nm～280nm；进样体积：10μl；流速：1ml·min^-1；流动相：流动相A为水，流动相B为乙腈；梯度洗脱程序：0～15min：5％B→8％B，15～35min：8％B→14％B，35～70min：14％B→30％B，70～90min：30％B→50％B，90～105min：50％B→100％B。

2.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中的黄芪川芎提取物的获取方式为：黄芪、川芎经过水提取后减压浓缩和干燥后制得；或黄芪和川芎经过70％乙醇回流提取后，经回收乙醇，加压浓缩干燥后制得；或川芎提取挥发油后，其药渣与黄芪加水提取后减压浓缩干燥后制得；或黄芪、川芎经过水提取后减压浓缩至相对密度达1.08～1.16，加入乙醇使含醇量达70％静置过夜，回收乙醇，减压浓缩干燥后制得；或川芎提取挥发油后，其药渣与黄芪加水提取后减压浓缩至相对密度达1.08～1.16，加入乙醇使含醇量达70％静置过夜，回收乙醇，减压浓缩干燥后制得。

3.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中的黄芪川芎提取物与甲醇的比例为1g:60ml；黄芪川芎提取物中川芎和黄芪的质量比为1:1～5。

4.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)中的微孔滤膜的孔径为0.22μm。

5.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(1)和(2)中的甲醇的体积百分数为90％～100％；步骤(1)中的乙醇的体积百分数为70％。

6.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(2)中的对照品溶液具体为：每1ml中各含阿魏酸、洋川芎内酯、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素30～40ng的混合溶液。

7.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中的Athena C18-WP色谱柱规格为4.6mm×250mm，填料粒度大小为5μm。

8.根据权利要求1所述的一种黄芪川芎提取物指纹图谱的测定方法，其特征在于：所述步骤(3)中的黄芪川芎提取物指纹图谱中12个色谱峰被确定为共有色谱峰，通过与对照品保留时间的比较，确定峰6为毛蕊异黄酮葡萄糖苷，峰7为阿魏酸，峰8为洋川芎内酯I，峰10为芒柄花苷，峰11为毛蕊异黄酮，峰12为芒柄花素。