[发明专利]用于获得免疫抑制性树突细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于产生免疫抑制性树突细胞的方法。本发明还涉及这种细胞用于治疗经历了实体器官移植和/或患有移植物抗宿主病、自身免疫病和超敏反应疾病之患者的用途。本发明特别地涉及相对于免疫刺激性树突细胞优先产生免疫抑制性树突细胞的方法。

背景技术

树突细胞(DC)被认为是用于起始和控制人类中细胞免疫应答的有效抗原呈递细胞。因为根据DC与T细胞的响应特异性克隆相互作用时其所表达的潜在性能的情况，DC可以是免疫刺激性的或免疫抑制性的，所以DC被认为是T细胞介导的免疫反应中非常重要的关键成员。作为宽的但是广泛接受的概括，未成熟DC比其更成熟对应物更具“耐受原性”，而成熟DC被认为比其未成熟前体更具“免疫原性”。由单核细胞离体产生并且具有特定抗原的DC在任一免疫方向上有效作用的能力依赖于其返回患者后的生存力和活力。逻辑上推断，反作用的免疫刺激性和免疫抑制性DC之间的平衡是DC依赖性治疗性免疫应答的方向和效力的主要决定因素。

本发明的目的是促进特别有利于产生强的以及临床相关的免疫应答之DC群的产生。虽然对基于DC的治疗有着很大的期望，例如在增强抗癌免疫力方面的努力，但是临床结果通常总是让人失望。例如，最近首个由FDA批准的用于实体瘤的免疫疗法Provenge是对由血液单核细胞离体产生DC的常规方法进行调整，其对患有晚期前列腺癌的患者产生仅4个月的存活的改善。此外，Provenge迄今没有示出减小经治疗之前列腺癌的大小。在阻碍所得DC的体内活力和生存力的条件下，诱导DC的常规方法以及FDA批准的用于“液体”恶性皮肤T细胞淋巴瘤(Cutaneous T Cell Lymphoma，CTCL)的疗法体外光化学疗法(Extracorporeal Photopheresis，ECP)受到相对异质DC群产生的阻碍。通过使用更接近生理的条件来产生治疗性DC，本发明能够产生更加同步成熟的DC，其生存力和活力不受产生它们的方法固有的因素抑制。另外，这种方法可适用于人和动物二者的白细胞。

DC引发CD8⁺细胞毒性T细胞(CTL)和CD4⁺T辅助细胞(Th1)应答二者。DC能够捕获和加工抗原，并且迁移到局部淋巴结以呈递捕获的抗原并诱导T细胞应答。在人类中，DC是外周血中相对稀少的组分(＜白细胞的1％)。然而，可通过实验室程序由CD34⁺前体或血液单核细胞分化大量DC。

由于前述性质，DC被认为是引起有效抗肿瘤免疫应答的一种重要细胞物质。想法是产生在其MHC I类和MHC II类复合体上呈递肿瘤特异性抗原并可被(再)引入到患者中从而发起对肿瘤的免疫攻击的树突细胞。然而，产生这种免疫刺激性树突细胞通常需要使用复杂并且相当昂贵的细胞因子混合物(cytokine cocktails)使CD34⁺前体或血液单核细胞分化。在那些标准方法中，以比在生理条件下体内遇到的那些高得多(通常按数量级)的浓度使用细胞因子。因此，对于基于DC的免疫调节产生的整体上令人失望的临床结果，提出一种的原因是由普通细胞因子方法产生的DC可能无法在患者中实际上远远更低的细胞因子浓度下有效作用。选择在显著高生理浓度的生长因子(例如，细胞因子)下离体产生的DC将依赖于在患者的体内环境中重现的条件。

除了前述免疫刺激性树突细胞外，已经描述了其他类型的树突细胞，即耐受原性树突细胞，其也被称为免疫抑制性树突细胞或免疫阻抑性树突细胞。这些类型的树突细胞在维持免疫耐受中具有重要作用，并且已经被讨论用于治疗情况如实体器官移植、移植物抗宿主病、自身免疫病和超敏反应疾病(参见，例如，Hu等.Immunology，(2010)，132，307-314)。