[发明专利]包含嵌合恒定结构域的抗体

说明书

本发明提供与特定Fc受体但是效应子功能降低结合的包含重组多肽的抗体、抗原结合蛋白和Fc‑融合蛋白，所述重组多肽含有嵌合重链恒定区序列。本发明提供制造用以在细胞系统中表达这些嵌合含Fc抗体、抗原结合蛋白以及Fc‑融合蛋白的构建体的方法，以及制造与分离所述嵌合含Fc蛋白的方法。

相关申请的交叉引用

本申请依据35 USC§119(e)要求2013年2月1日提交的美国临时申请第61/759,578号的权益，所述申请以引用方式并入本文。

序列表

本申请以引用方式并入有以计算机可读形式呈交的为2014年1月29日创建的文件8550PCT_ST25.txt(43,512字节)的序列表。

发明领域

本发明涉及由包含嵌合恒定区、更具体来说在重链恒定区中包括嵌合铰链区的重组多肽工程改造的抗体或抗原结合蛋白。本发明涉及包含重组多肽的抗体和抗原结合蛋白，所述重组多肽降低效应子功能并提供用于疗法中的优点。

发明背景

IgG类的免疫球蛋白作为治疗剂是引人注意的。IgG在人体内以四种亚类存在，即IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。IgG的重链恒定(C_H)区含有三个结构域，即C_H1、C_H2、C_H3，其中C_H1与C_H2是通过一个铰链来连结。尽管每个亚类的作用在物种之间有所不同，但已知的是，重链恒定结构域负责各种生物效应子功能。人IgG亚类通过它们与Fcγ受体(FcγR)的相互作用来介导细胞免疫应答的多血症，所述相互作用如细胞杀灭、补体活化、吞噬作用与调理作用。试图要理解并操纵IgG亚类结合至FcγR的效应，研究人员已对IgG的恒定结构域进行不同突变并研究所产生的IgG/FcγR相互作用(参见例如Canfield和Morrison J Exp Med73，1483-1491(1991)；Chappel，M.S.等人，JBC268(33)，25124-31(1993)；以及Armour，K.L.等人，Eur J Immunol 29，2613-24(1999))。

人IgG抗体的Fc依赖性细胞毒性活性需要抗体的Fc区(其至少由功能性CH2和CH3结构域所组成)结合至效应子细胞表面上的FcγR，所述效应子细胞为如天然杀手细胞、活化的巨噬细胞或类似细胞。补体介导的溶解也可以通过Fc区与各种补体成分的相互作用来触发。关于FcγR结合，已暗示抗体的铰链区以及C_H2结构域中的数个氨基酸残基至为重要(参见Sarmay，G等人，Mol Immunol 29，633-9(1992)；Greenwood，J等人，Eur.J.Immunol，23(5)，1098(1993)，Morgan，A.等人，Immunology，86，319(1995)，Stevenson，GT，ChemicalImmunology，65，57-72(1997))。在CH2结构域中位点(N297)的糖基化作用以及其糖类组成的变化强烈地影响IgG/FcγR相互作用(Stevenson，GT，Chemical Immunology，65，57-72(1997)；Sibéril等人，Immunol Ltrs106，111-118(2006))。

对某些抗体疗法来说，有利的是将Fc受体结合特性工程改造来激活可用效应子机制中的全部、一些或者不激活任何可用效应子机制，而不会影响抗体的药物动力学特性。治疗特性的所需组合不可在天然抗体库中获得。设计带有降低效应子功能的抗体应为有效的，例如当治疗目标不是要杀灭靶细胞，而是阻断或激活其表面上的细胞表面分子但不诱发细胞毒性时为有效的。当抗体为双特异性，并且其所需治疗特性是由不同结合特异性产生时，就会需要降低结合至Fc受体的另一种设定。例如，双特异性抗体的常见用法是合并肿瘤靶定特异性与T细胞活化特异性以触发肿瘤特异性T细胞杀灭。在这个情况下，如果Fc部分结合至Fc受体，那么有可能通过T细胞触发带有Fc受体的细胞的不合需要的杀灭，或带有Fc受体的细胞(如天然杀手细胞或巨噬细胞)的T细胞杀灭。