[发明专利]用于从蛋白制剂去除内毒素的材料和方法

权利要求书

1.一种方法，包括：(i)将过饱和量的尿囊素添加至蛋白制剂中，所述蛋白制剂包含所需蛋白和作为污染物的至少一种内毒素，其中所述所需蛋白是抗体；(ii)在步骤(i)后去除固体以提供样品用于进一步纯化；(iii)提供包括填充在柱中的正电性粒子的填充粒子床，所述填充粒子床具有粒子间体积；(iv)用被选择用于防止所述所需蛋白与所述柱中的正电性粒子结合的缓冲液平衡所述填充粒子床，其中所述缓冲液具有6-8的范围的pH，并且所述缓冲液具有0mM-150mM的范围的氯化钠浓度；(v)将样品体积施加到所述填充粒子床，其中所述正电性粒子支持空隙排阻色谱，并且其中所述样品体积不大于所述粒子间体积；和(vi)洗脱包含所述所需蛋白和减少量的所述内毒素的经纯化样品，其中洗脱的所述所需蛋白驻留在平衡所述柱的缓冲液中。

2.权利要求1所述的方法，其中尿囊素的过饱和量是选自由下列各项组成的组的量：(i)5％，(ii)6％-10％，和(iii)15-20％，其中所述量作为重量/体积提供。

3.权利要求1所述的方法，其中尿囊素的过饱和量是选自由下列各项组成的组的量：(i)0.6-6％，(ii)10％-15％，(iii)20-50％，和(iv)大于50％，其中所述量作为重量/体积提供。

4.权利要求1所述的方法，其中尿囊素的过饱和量是10％的量，其中所述量作为重量/体积提供。

5.权利要求1所述的方法，其中去除所述固体包括选自由下列各项组成的组中的一种：沉降、离心、过滤、及其组合。

6.权利要求1所述的方法，其中在步骤(i)之前、期间或之后调整所述蛋白制剂的pH或盐浓度。

7.权利要求1所述的方法，其中在步骤(iii)之前调整所述蛋白制剂的pH或盐浓度。

8.权利要求1所述的方法，其中所述样品体积相对于填充床的所述样品体积为小于40％。

9.权利要求1所述的方法，其中所述样品体积相对于填充床的所述样品体积为小于35％。

10.权利要求1所述的方法，其中所述样品体积相对于填充床的所述样品体积为小于30％。

11.权利要求1所述的方法，其中所述样品体积相对于填充床的所述样品体积为小于20％。

12.权利要求1所述的方法，其中所述样品体积相对于填充床的所述样品体积为小于10％。

13.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的99％。

14.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的95％。

15.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的90％。

16.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的80％。

17.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的70％。

18.权利要求1所述的方法，其中施加至所述床的所述样品体积比所述粒子间体积小一个增量，所述增量为所述粒子间体积的60％。