[发明专利]α-突触核蛋白抗体及其用途

说明书

本发明描述了对聚合形式的α‑突触核蛋白具有高亲和性且对单体形式的α‑突触核蛋白具有低亲和性的抗体。该抗体用于诊断神经退行性疾病。

发明领域

本发明涉及对α-突触核蛋白聚合体(例如淀粉样纤维、初原纤维或低聚物)具有高结合亲和力且对α-突触核蛋白低聚物具有低结合亲和力的抗体或其片段。本发明还涉及这些抗体及片段在诊断、治疗和预防与α-突触核蛋白相关的神经病理中的用途。

背景

突触核蛋白是小分子蛋白家族，约14kDa，其在神经组织中高水平表达。该家族的三个成员是α-突触核蛋白、β-突触核蛋白和γ-突触核蛋白。

α-突触核蛋白主要在脑组织中表达，并主要位于突触前神经元末梢。人类形式的α-突触核蛋白的一级结构是由140个氨基酸的多肽构成。人类α-突触核蛋白的野生型序列可见于图20(SEQ ID NO:49)。α-突触核蛋白通常以可溶性单体蛋白存在，但根据其环境可采用若干不同的折叠构象。单体α-突触核蛋白也可以聚合成低聚物和高分子量不溶性纤维。

与突触核蛋白异常相关的疾病通常被称为共核蛋白病(synucleinopathy)。共核蛋白病包括神经退行性疾病、帕金森氏病(PD)、路易氏体失智症(DLB)和多系统萎缩症(MSA)。在共核蛋白病中，已表明，在PD和DLB的脑匀浆中可溶性α-突触核蛋白低聚物与正常脑相比要高。此外，常常表征PD和DLB晚期的神经病理性病变(路易氏体)已经基本上被认为是由纤维状α-突触核蛋白沉积物组成。

市售α-突触核蛋白抗体是已知的，并且被广泛地用于表征脑中的PD病理。然而，这种抗体是非特异性的，并且既识别α-突触核蛋白的单体形式又识别α-突触核蛋白的聚合形式，并且无法识别α-突触核蛋白的所有聚合形式。

已知的α-突触核蛋白抗体包括Syn-1(BD生物科学(BD Biosciences))和mAb 211(圣克鲁斯生物技术有限公司(Santa Cruz Biotechnology))，已知它们同样结合α-突触核蛋白的单体形式和聚合形式。

WO2011/104696公开了特异性识别初原纤维形式的α-突触核蛋白的抗体。这些抗体显示与α-突触核蛋白原纤维和单体的低结合亲和力。

发明内容

本发明涉及对α-突触核蛋白聚合体具有高结合亲和力且对单体形式的α-突触核蛋白具有低结合亲和力的抗体及其片段。

本发明还涉及包含这种抗体或其片段的组合物、使用所述抗体或片段检测α-突触核蛋白聚合体的存在的方法，以及它们在诊断与α-突触核蛋白相关的疾病中的用途。

在其它实施方案中，本发明涉及包含这种抗体或其片段的组合物和使用所述抗体或片段治疗或预防与α-突触核蛋白的病理相关的疾病的方法。

使用对α-突触核蛋白聚合体有特异性的抗体可帮助揭示新的PD和其它共核蛋白病的病理。

通过产生对α-突触核蛋白聚合体有特异性并对α-突触核蛋白单体具有低结合亲和力的抗体，本发明提供了跟踪与α-突触核蛋白相关的神经退行性疾病的进展的新工具。本发明的抗体还提供了可用于治疗与α-突触核蛋白相关的疾病的抗体。

附图说明

现在将通过举例并参考附图来说明本发明，在附图中：

图1示出如实施例1中所描述的用α-突触核蛋白原纤维免疫的宿主(宿主19、22和23)和用α-突触核蛋白低聚物免疫的宿主(宿主210、211和212)的效价检测结果。

图2示出如实施例2所描述的用于筛选杂交瘤对α-突触核蛋白聚合体(原纤维(F)、低聚物(O)和单体(M))的特异性的点图(dot plots)结果。