[发明专利]用于制造癌症组合物的方法

说明书

优先权

本申请要求2013年3月15日提交的美国临时申请第61/791,909号的优先权，该临 时申请在此通过引用以其整体并入。

发明领域

本发明涉及制造对癌症有用的前药化合物的方法。在一个实例中，本发明涉及制 造前药的方法以及制造其某些中间体的方法，所述前药包括连接至具有序列Asp-Glu*Glu* Glu*Glu(其中用*指示的键中的至少一个是γ羧基键合)的肽的天冬氨酸的毒胡萝卜素衍生 物8-O-(12-氨基十二烷酰基)-8-O-去丁酰基毒胡萝卜素(12ADT)，并且具有式1的式：

本发明还涉及通过本文阐明的工艺获得的化合物和中间体。

发明背景

一种肽前药化合物，其被鉴定为G-202并且包括被连接至具有序列Asp-Glu*Glu* Glu*Glu(其中用*指示的键中的至少一个是γ羧基键合)的肽的天冬氨酸的毒胡萝卜素衍生 物8-O-(12-氨基十二烷酰基)-8-O-去丁酰基毒胡萝卜素(12ADT)，并且具有以下结构式：

(式1)已经在美国专利第7,767,648号和第7,468,354号中阐明并描述，该美国专 利以其整体并入本文。包含G-202的可注射的癌症组合物和用于使用G-202治疗肝细胞癌的 方法和组合物也在美国临时申请第61/714,662号和第61/693,273号中公开，该临时申请以 其整体并入本文。

对于产生G-202的工艺的主要挑战是由于缺乏任何中间体或最终的活性药物成分 (API)的结晶性。这阻止了在合成中的任何位置使用结晶来除去杂质。此限制使反应应当是 高效的且产生很少至没有杂质成为必要。此外，结晶性的缺乏增加了诸如以下的交替的纯 化工艺的价值：水溶液萃取、极性/非极性有机分配、沉淀、研碎和有效的色谱纯化。本文公 开的此工艺成功地并入了有效的合成策略和所有的这些纯化技术以生成纯的G-202。

发明概述

在一个方面中，本发明提供用于制造具有化学名称8-O-(12-氨基十二烷酰基)-8- O-去丁酰基-毒胡萝卜素)天冬氨酸-γ-谷氨酸-γ-谷氨酸-γ-谷氨酸-谷氨酸OH的式I的化 合物的方法：

所述方法包括：

(a)对毒胡萝卜素(Tg)(式2)进行改性

以得到化合物8-O-去丁酰基-毒胡萝卜素(DBTg)(式3)：

和(b)在二甲基氨基吡啶(DMAP)、二异丙基碳二亚胺(DIC)和CH₂Cl₂的存在下添加 化合物Boc-12-AD(式4)：

以得到Boc-12ADT(式5)：

和(c)使Boc-12ADT脱保护以得到12ADT(式6)：

和(d)在乙基-(二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)、二异丙基乙胺(iPr₂NEt)、羟基 苯并三唑(HOBt)和二甲基甲酰胺(DMF)的存在下将12-ADT与Boc-Asp-Glu(OtBu)-Glu (OtBu)-Glu(OtBu)-OtBu(式7)：

组合以得到PG-202(式8)：

和(e)使PG-202发生反应以得到化合物，粗制的G-202(式9)：

和(f)然后将粗制的G-202转化为式1的化合物。

在本发明的另一个实施方案中，提供了制造化合物BOC-12-AD(式4)的方法：

所述方法包括：

(i)在乙酰氯(AcCl)的存在下使化合物12-AD(式10)：

与甲醇(MeOH)发生反应以得到式11的化合物：