[发明专利]具有贮存稳定性、用于快速浇制、印迹和成像的聚丙烯酰胺凝胶有效
申请号: | 201480015965.6 | 申请日: | 2014-03-10 |
公开(公告)号: | CN105263606B | 公开(公告)日: | 2018-01-12 |
发明(设计)人: | 李雷;杨雪梅;C·贝利斯勒 | 申请(专利权)人: | 生物辐射实验室股份有限公司 |
主分类号: | C07K1/26 | 分类号: | C07K1/26 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司31100 | 代理人: | 樊云飞,陶家蓉 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 贮存 稳定性 用于 快速 印迹 成像 聚丙烯酰胺 凝胶 | ||
1.一种制备聚丙烯酰胺凝胶的方法,所述方法包括:
提供第一溶液和第二溶液,所述第一溶液包含丙烯酰胺/二丙烯酰胺,所述第二溶液包含三乙醇胺、两性电解质和共轭两性电解质;所述两性电解质选自甘氨酸和N-三(羟甲基)甲基甘氨酸;所述共轭两性电解质是由pKa在8.3~9.6范围内的氨基酸组成的;所述第一溶液和第二溶液分别储存至少7天;
形成所述第一溶液、第二溶液和聚合催化剂的混合物;
将所述混合物加入模具;和
在足以生成所述聚丙烯酰胺凝胶的条件下于所述模具中孵育所述混合物。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶是不连续的,并且所述方法还包括:在所述聚丙烯酰胺凝胶上制备积层凝胶。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在配制之前不超过24小时内,形成所述混合物。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于,所述方法还包括在聚丙烯酰胺凝胶生成之后至少7、14、21或28天,采用所述聚丙烯酰胺凝胶进行电泳。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶还包含下述一种或多种物质:甘油、Tris和在紫外光辐照后与色氨酸残基反应形成荧光化合物的卤素取代的化合物。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述共轭两性电解质是天冬酰胺、牛磺酸、苏氨酸、丝氨酸和组氨酸。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述卤素取代的化合物是三氯烷烃。
8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述卤素取代的化合物选自下组:氯仿、三氯乙酸和三氯乙醇,或其混合物。
9.一种用于配制聚丙烯酰胺凝胶的试剂盒,所述试剂盒包含:
第一容器,其包含含有丙烯酰胺和二丙烯酰胺的溶液;和
第二容器,其包含三乙醇胺、选自甘氨酸和N-三(羟甲基)甲基甘氨酸的两性电解质、和由pKa在8.3~9.6范围内的氨基酸组成的共轭两性电解质。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述凝胶还包含下述一种或多种物质:甘油、Tris和在紫外光辐照后与色氨酸残基反应形成荧光化合物的卤素取代的化合物。
11.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述共轭两性电解质是天冬酰胺、牛磺酸、苏氨酸、丝氨酸和组氨酸。
12.如权利要求10所述的试剂盒,其特征在于,所述卤素取代的化合物是三氯烷烃。
13.如权利要求10所述的试剂盒,其特征在于,所述卤素取代的化合物选自下组:氯仿、三氯乙酸和三氯乙醇,或其混合物。
14.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述第二容器中的三乙醇胺是10-250mM,所述第二容器中的所述两性电解质是50-500mM,并且所述第二容器中的所述共轭两性电解质是10-500mM。
15.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包含Tris和/或乙醇酸。
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