[发明专利]用于通过发酵生产氨基酸的微生物和方法在审
申请号: | 201480019244.2 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN105229157A | 公开(公告)日: | 2016-01-06 |
发明(设计)人: | F·瓦尔特;M·佩尔西克;J·卡利诺夫斯基;A·许泽;W·克莱斯;A·雷特 | 申请(专利权)人: | 赢创德固赛有限公司 |
主分类号: | C12P13/08 | 分类号: | C12P13/08;C12P13/12;C12N9/02 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 左路;区斌 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 通过 发酵 生产 氨基酸 微生物 方法 | ||
技术领域
本发明涉及产生和/或分泌有机化合物的微生物,其中所述微生物具有增加的转氢酶(LpdA蛋白质,lpdA基因的基因产物)活性,以及使用根据本发明的微生物用于生产有机化合物的方法。
本发明在由德国联邦教育及研究部(FederalMinistryforEducationandResearch)(BMBF)(授权号0313917A)提议的项目的范围内发生。
背景技术
有机化合物包括特别是氨基酸、有机酸、维生素、核苷和核苷酸,在人类医学、制药工业、食品工业且尤其特别是动物营养中有用。
通过经由棒状细菌菌株尤其是谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum),或通过肠杆菌科(Enterobacteriaceae)菌株尤其是大肠杆菌(Escherichiacoli)的发酵,产生大量这些化合物例如L-赖氨酸。由于相当大的经济重要性,存在改良生产方法的不断努力。工艺改良可以涉及发酵中的技术措施,例如搅拌和供应氧,或涉及营养培养基的组成,例如在发酵期间的糖浓度,或涉及例如通过离子交换层析逐渐达到产物形式,或涉及微生物自身的固有性能特性。
在野生型菌株中,氨基酸的生物合成途径遭受严格的代谢控制,其确保氨基酸仅在细胞自身需要的水平下产生。对于有效生产方法的一重要需求因此是可获得合适的微生物,其与野生型生物体相比较具有产生所需氨基酸的能力,其中所需氨基酸急剧增加超出其自身需求(过度生产)。
这些微生物的性能特性的改良采用诱变、选择和挑选突变体的方法。以这种方式,获得的菌株对抗代谢药具有抗性,或对于具有调节重要性的代谢产物是营养缺陷型的,并且产生L-氨基酸。已知的抗代谢药是赖氨酸类似物S-(2-氨乙基)-L-半胱氨酸(AEC)。
这些年来,重组DNA技术的方法也已用于改良棒状杆菌属(Corynebacterium)尤其是谷氨酸棒状杆菌,或埃希氏杆菌属(Escherichia)尤其是大肠杆菌的L-氨基酸生产菌株,通过修饰或强化或弱化个别氨基酸生物合成基因并且研究对氨基酸生产的作用。
众多细菌的染色体的核苷酸序列是已知的。
谷氨酸棒状杆菌ATCC13032的基因组的核苷酸序列在Ikeda和Nakagawa(AppliedMicrobiologyandBiotechnology62,99-109(2003))、EP1108790以及Kalinowski等人(JournalofBiotechnology104(1-3),(2003))中得到描述。
谷氨酸棒状杆菌R的基因组的核苷酸序列在Yukawa等人(Microbiology153(4):1042-1058(2007))中得到描述。
Corynebacteriumefficiens的基因组的核苷酸序列在Nishio等人(GenomeResearch.13(7),1572-1579(2003))中得到描述。
白喉棒状杆菌(Corynebacteriumdiphtheriae)NCTC13129的基因组的核苷酸序列由Cerdeno-Tarraga等人(NucleicAcidsResearch31(22),6516-6523(2003))进行描述。
杰氏棒状杆菌(Corynebacteriumjeikeium)的基因组的核苷酸序列由Tauch等人(JournalofBacteriology187(13),4671-4682(2005))进行描述。
谷氨酸棒状杆菌的基因组的核苷酸序列还在美国国立医学图书馆(NationalLibraryofMedicine)(Bethesda,MD,USA)的美国国家生物技术信息中心(NationalCenterforBiotechnologyInformation)(NCBI)的数据库、日本DNA数据库(DNADataBankofJapan)(DDBJ,Mishima,日本)、或欧洲分子生物学实验室(EuropeanMolecularBiologyLaboratories)(EMBL,Heidelberg,德国或Cambridge,UK)的核苷酸序列数据库中可获得。
通过发酵生产L-氨基酸的各个方面在R.Faurie和J.Thommel,AdvancesinBiochemicalEngineeringBiotechnology,第79卷(Springer-Verlag,Berlin,Heidelberg(Germany)2003)中总结。
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