[发明专利]桥接双环核苷

说明书

本发明涉及2’‑C‑桥接双环核苷和核苷酸，以及包含至少一个2’‑C‑桥接双环核苷酸的寡核苷酸。本发明进一步提供包含所述核苷，核苷酸，以及寡核苷酸的药物组合物，以及它们相应的使用和合成方法。

相关申请

本申请要求2013年3月15日提交的美国临时申请No.61/791,704的优先权和权益，通过提及将其完整收入本文。

发明领域

本发明涉及经修饰的核苷，核苷酸，以及寡核苷酸，当施用到患者时，具有合成，效力，递送效率，目标特异性，稳定性，和/或毒性的优势。

发明背景

反义寡核苷酸抑制物的寡核苷酸化学模式或基序具有改善抑制物的递送，稳定性，效力，特异性和/或毒性概况的潜能，并且这是需要的，用于在治疗背景中有效地靶向RNA功能。

发明概述

本发明涉及经修饰的核苷，核苷酸，和寡核苷酸，其包含至少一个2’-C-桥接双环核苷酸(CBBN)，以及包含经修饰的寡核苷酸的药物组合物。本发明还提供这些寡核苷酸，以及合成中间物的使用和合成的方法。在多个实施方案中，寡核苷酸为反义抑制剂，其提供效力，递送效率，目标特异性，稳定性，和/或毒性的优势。

在一个方面，本发明提供具有式I结构的2’-C-桥接双环核苷或核苷酸(CBBN)：

其中X为N或S；W₁和W₂独立地为H，醇保护基团，磷酸酯，硫代磷酸酯，二或三磷酸酯(di-or tri-phosphate)，或亚磷酸胺；W₃独立地为不存在(null)，H，O，胺保护基团，亚磷酸胺，氨基磷酸酯，二氨基磷酸酯(phosphordiamidate ester)，甲基，烷基，环烷基，氨甲酰(carboxamide)，糖，脂肪酸，或本文的其它共轭分子，–C_1-4(O)R，或–COOR，其中R为芳基，线性或环烷基或烯基，糖，脂肪酸，或其它分子缀合物，如药物缀合物；B为核碱基。在一些实施方案中，核碱基是嘧啶碱基。在其它实施方案中，核碱基是嘌呤碱基。

在另一个方面，本发明提供寡核苷酸，其包含至少一个2’-C-桥接双环核苷酸。寡核苷酸中2’-C-桥接双环核苷酸的数量可以不同。例如，2’-C-桥接双环核苷酸的数量可以为至少约10％的核苷酸，至少约25％的核苷酸，至少约50％的核苷酸，或至少约75％的核苷酸。寡核苷酸的长度也可以不同。例如，本发明的寡核苷酸长度可以为从约5个至约50个核苷酸，或长度为约10至约25个核苷酸。在其它实施方案中，寡核苷酸长度可能少于约10个核苷酸(例如，从约5个至约10个核苷酸)或长度少于约8个核苷酸(例如，从约5个至约8个核苷酸)。

寡核苷酸还可以包括至少一个具有2’修饰的核苷酸，2’修饰选自2’-脱氧，2’-O-甲基，2’-氟代，和2’至4’桥接结构。在特定实施方案中，寡核苷酸还包含骨架修饰，例如硫代磷酸酯连接和/或二氨基磷酸连接。在其它实施方案中，寡核苷酸包括至少一个嘌呤和/或嘧啶碱基修饰。例如，碱基修饰可以在嘧啶碱基的C-5位置和/或嘌呤碱基的C-8位置。在一些实施方案中，寡核苷酸包括一个或多个吗啉代核苷酸。

在多个实施方案中，寡核苷酸包含与人微小RNA的核苷酸序列至少基本相同或互补的核苷酸序列。例如，寡核苷酸可以包含与人miR-15a,miR-15b,miR-29,miR-92,miR-143,miR-145,miR-195,miR-206,miR-208a,miR-208b,miR-378,miR-451和/或miR-499序列基本互补的核苷酸序列。在又进一步的实施方案中，寡核苷酸包含与人微小RNA的核苷酸序列完全相同或互补的核苷酸序列。在多个实施方案中，寡核苷酸的序列可以经设计使得模仿miRNA或通过反义抑制靶向miRNA。