[发明专利]包含富集主要电荷同工型的抗体组合物的药物

权利要求书

1.一种可以通过以下方法获得的单克隆抗体组合物用于制备药物的用途，所述方法包括：

a)从细胞克隆、非人类转基因动物或转基因植物产生单克隆抗体组合物，

b)通过离子交换层析、通过层析聚焦或通过疏水相互作用层析将步骤(a)中获得的组合物分级分离，和

c)合并步骤b)中获得的与层析图主峰相对应的一个或几个层析级分，因而获得的单克隆抗体组合物富含所述主峰，所述主峰占步骤c)中获得的组合物的层析图的至少90％，其中所述抗体在其Fc片段的N–糖基化位点上包含双天线复杂型聚糖结构并且包含小于或等于65％的岩藻糖含量。

2.根据权利要求1所述的用途，其中步骤b)的分级分离通过以下层析技术之一实现：

·采用离子力梯度洗脱的离子交换层析，

·采用pH梯度洗脱的离子交换层析，所述梯度在阳离子交换情况下递增，在阴离子交换情况下递减，

·采用离子力和pH梯度洗脱的离子交换层析，

·采用置换分子洗脱的离子交换层析，

·层析聚焦，和

·疏水相互作用层析。

3.根据权利要求2的用途，其中步骤b)的分级分离通过以下层析技术之一实现：

·层析聚焦，使用柱Mono^TM P(GE Life Sciences)，通过递降pH梯度使用两种缓冲液：缓冲液A：二乙醇胺25mM，缓冲液B：polybuffer 96+pharmalyte 8–10.5从9.5至8.0洗脱；

·阳离子交换层析，通过组合缓冲液C：20mM NaH₂PO₄，60mM NaCl(pH 6)和缓冲液D：20mM Na₂HPO₄，60mM NaCl(pH 10)获得的递增pH梯度洗脱，梯度60分钟内从10％至60％的缓冲液B。

4.根据权利要求1的用途，其中所述主峰占步骤c)中获得的组合物的层析图的至少95％。

5.根据权利要求1的用途，其中所述主峰占步骤c)中获得的组合物的层析图的至少99％。

6.根据权利要求2的用途，其中所述主峰占步骤c)中获得的组合物的层析图的至少95％。

7.根据权利要求2的用途，其中所述主峰占步骤c)中获得的组合物的层析图的至少99％。

8.根据权利要求1的用途，其中在组合物中存在的抗体的至少95％的重链不包含任何C末端赖氨酸残基。

9.根据权利要求2的用途，其中在组合物中存在的抗体的至少95％的重链不包含任何C末端赖氨酸残基。

10.根据权利要求1的用途，其中所述抗体针对健康供体细胞上存在的非遍在抗原、癌细胞抗原、病原体感染的细胞的抗原或免疫细胞的抗原。

11.根据权利要求2的用途，其中所述抗体针对健康供体细胞上存在的非遍在抗原、癌细胞抗原、病原体感染的细胞的抗原或免疫细胞的抗原。

12.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗体是抗Rhesus D抗体并且所述组合物意在预防Rhesus阴性个体中的同种异体免疫。

13.根据权利要求2所述的用途，其中所述抗体是抗Rhesus D抗体并且所述组合物意在预防Rhesus阴性个体中的同种异体免疫。

14.根据权利要求1所述的用途，其中所述抗体针对癌细胞的抗原并且所述组合物意在治疗癌症。

15.根据权利要求14所述的用途，其中所述抗体针对以下抗原之一：CD20、Her2/neu、CD52、EGFR、EPCAM、CCR4、CTLA–4(CD152)、CD19、CD22、CD3、CD30、CD33、CD4、CD40、CD51(整联蛋白α–V)、CD80、CEA、FR–alpha、GD2、GD3、HLA–DR、IGF1R(CD221)、磷脂酰丝氨酸、SLAMF7(CD319)、TRAIL–R1和TRAIL–R2。

16.根据权利要求2所述的用途，其中所述抗体针对癌细胞的抗原并且所述组合物意在治疗癌症。