[发明专利]改进的测定方法

权利要求书

1.用于检测样品中的目的分析物的试剂盒，其在一个或多个管形瓶、容器或区室中包含：

a.表面，包含(i)针对该分析物的捕捉试剂，和(ii)包含与扩增子序列互补的锚定寡核苷酸序列的锚定试剂；

b.针对该分析物的第一检测试剂，其连接于第一核酸探针；和

c.针对该分析物的第二检测试剂，其连接于第二核酸探针，

其中所述第二核酸探针包含与所述锚定寡核苷酸序列互补的延伸序列。

2.权利要求1的试剂盒，其中所述捕捉试剂包含抗体、抗原、配体、受体、寡核苷酸、半抗原、表位、模拟位或适体。

3.以下组分在制备用于检测样品中的目的分析物的试剂盒中的用途，所述组分包括：

a.表面，包含(i)针对该分析物的捕捉试剂，和(ii)包含与扩增子序列互补的锚定寡核苷酸序列的锚定试剂；

b.针对该分析物的第一检测试剂，其连接于第一核酸探针；和

c.针对该分析物的第二检测试剂，其连接于第二核酸探针；

所述试剂盒用于包含以下步骤的方法：

a.使分析物结合：(i)表面上的针对该分析物的捕捉试剂，该表面包含所述捕捉试剂；(ii)针对该分析物的第一检测试剂，其连接于第一核酸探针；和(iii)针对该分析物的第二检测试剂，其连接于第二核酸探针；由此在表面上形成包含结合试剂、该分析物和所述第一和第二检测试剂的复合物，

其中所述表面还包含锚定试剂，所述锚定试剂包含与扩增子序列互补的锚定寡核苷酸序列，且其中所述锚定寡核苷酸序列包含单链寡核苷酸序列；

b.利用需要所述第一和第二探针接近使得所述第一和第二探针彼此临近地与模板核酸序列杂交从而促进所述模板连接(ligation)的延伸过程，延伸所述第二探针以形成延伸序列，其包含与所述锚定寡核苷酸序列互补的锚定寡核苷酸序列互补体，其中所述延伸序列还包含一个或多个检测序列；

c.将所述锚定寡核苷酸序列与所述锚定寡核苷酸序列互补体杂交；并

d.测量结合至表面的延伸序列的量，其中所述测量步骤包括在延伸过程期间渗入标记的寡核苷酸或使所述延伸序列与互补于所述一个或多个检测序列的多种经标记探针接触。

4.权利要求3的用途，其中所述捕捉试剂或第一检测试剂或第二检测试剂是抗体、抗原、配体、受体、寡核苷酸、半抗原、表位、模拟位(mimitope)或适体。

5.权利要求4的用途，其中所述捕捉试剂是抗体。

6.权利要求3的用途，其中所述第一检测试剂是抗体、抗原、配体、受体、寡核苷酸、半抗原、表位、模拟位或适体。

7.权利要求6的用途，其中所述第一检测试剂是抗体。

8.权利要求3的用途，其中所述第二检测试剂是抗体、抗原、配体、受体、寡核苷酸、半抗原、表位、模拟位或适体。

9.权利要求8的用途，其中所述第二检测试剂是抗体。

10.权利要求3的用途，其中所述捕捉试剂和所述第一和第二检测试剂是针对分析物的抗体。

11.权利要求3的用途，其中所述锚定寡核苷酸序列包含单链寡核苷酸序列或双链寡核苷酸序列。

12.权利要求3的用途，其中所述锚定寡核苷酸序列包含双链寡核苷酸序列。

13.权利要求3的用途，其中所述延伸序列还包含一种或多种检测序列，且所述测量步骤还包括使所述延伸序列与互补于所述一种或多种检测序列的多种经标记探针接触；或其中所述延伸序列还包含一个或多个经标记的碱基，且所述测量步骤还包括检测所述一个或多个经标记的碱基的存在。